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联硕生物
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联硕生物科技有限公司成立于2010年,是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大客户的支持及公司全体员工不懈的努力下,公司的服务和业务网络已遍及全国,成为了国内生命科学领域产品的主要供应商之一。自成立以来,联硕生物一直秉承客户至上、服务至诚;质量第一、诚信为本的理念,致力于做靠谱放心的专业服务商,助力您的科研成就!
主营品牌:LANSO、Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等
主营产品:
试剂盒:ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、分子生物学试剂盒、细胞凋亡试剂盒
细胞培养:血清,专业培养基,常用传统培养基
耗材:进口、国产细胞培养耗材、普通实验耗材
生化试剂:原装进口生化试剂、进口分装生化试剂、国产生化试剂
抗体:进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗等
公司信息 :
联硕生物(上海-浙江)
公司官网:www.biolianshuo.com
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文献和实验原代细胞冻存技术:1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。3、1000rpm离心5分钟,弃上清液。4、沉淀加含DMSO的培养液,计数,调整至(1-10)×106 /ml。5、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。6、密封冻存管,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。7、用记号笔标明细胞种类,冻存日期。8、按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮。
在园子里经常看到询问冻存、复苏细胞的方法和注意事项。故介绍一些致命的 “败笔”,和解决方法。 希望对大家有帮助。 ( 以 Raji 为例) 一、细胞冻存: 1. 错误的时机: 细胞状态不好(长的太过了,培养液已经很黄;细胞可疑污染;细胞已 经开始凋亡或崩解;连续培养超过二个月,细胞性状已有改变改变)。 解决: 最佳时机:细胞增殖旺盛,情况稳定,试验效果良好,复苏后两周内。 2. 细胞太少: 冻存时细胞浓度低于 1-5×1000,000/ml。(复苏很难成功)。 解决: 离心后调整细胞
长期保存。(4)复苏:急速融化复苏可防止损害细胞。冻结细胞从液氮中取出后,应立即放入37℃~43℃的水浴中,30秒至一分钟内融化。2、冻存与复苏方法适用于原始组织、原代细胞和细胞系(株)。(1)细胞用胰蛋白酶+EDTA消化后用冻存液稀至2~5X106/ml。(2)分装于2ml冻存管中,装量1ml,封口,作好标记,用几层纱布扎好。(3) 冻存管进入液氮前应有一个渐降温的过程,以1℃/min的速度降温,一般挂在液氮上空8小时后,投入液氮贮存罐中长期保存。(4)为使冻存的细胞复苏,将冻存管置于37℃~43℃水浴中,充分
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