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华科鉴联基因科技
端粒酶活性检测
(关键词:端粒酶检测、TRAP电泳法)
端粒( telomere) 是真核细胞生物染色体末端的特殊DNA-蛋白质结构, 含有多个重复序列, 人类为TT AGGG, 这一结构在染色体复制及保持染色体稳定中起重要作用。有证据表明, 端粒DNA长度随着每次细胞分裂而逐渐缩短, 与细胞的寿命密切相关, 而其本身的合成又依赖于端粒酶( telomerase) 的活性。研究发现, 在绝大多数的恶性肿瘤组织及肿瘤细胞株中有高活性的端粒酶表达, 而正常体细胞则不能检出端粒酶活性。因此, 对组织或细胞的端粒酶活性检测具有重要意义。
端粒酶的检测:传统检测端粒酶活性方法需要大量组织或细胞,需要大量放射或制胶时间,实验过程繁琐,且检测周期长。TRAP法做为端粒酶活性检测的金标准,然而在结果解读时,以银染法PAGE胶检测端粒酶活性为例:因通过条带的明暗程度判读,存在结果主观判读,且重复性较差的不足。
本公司提供的端粒酶活性检测方案,是以TRAP法+毛细管电泳技术为基础,以HELA细胞作为阳性标准品,可以直观、准确地检出组织或细胞样本的TTAGGG六碱基的重复次数和TRAP扩增的序列长度。。
样本要求:1*10的6次方的活性状态细胞。
检测周期:收到样本5-7个工作日
检测结果图谱: 
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文献和实验的PCR端粒酶活性检测试剂盒基于同样的的原理,利用银染技术检测端粒酶的活性。阳性结果在凝胶电泳上显示相隔6bp 的梯状条带,条带的多、寡、深或浅表示端粒酶活性的大小。TRAP-银染法保留了传统TRAP 法灵敏度高、特异性强等优点,避免了同位素的放射污染。同时,还增设了内标准物,提供阳性对照品,优化了引物设计,使PCR效果进一步提高,使之能够高灵敏的检测到细胞和组织提取物中端粒酶的活性。 TRAP-银染法端粒酶活性检测试剂实验方法 试剂盒组份 组分 50 次实验量
糖化血红蛋白,目前美国ADA已将HbA1c作为诊断糖尿病的新指标。 免疫凝集法 原理是糖化血红蛋白与相应的单抗结合进而发生凝集反应,通过测定吸光度来表示凝集量,可用于全自动生化分析仪上进行测定。要求对样品成批试验,每次试验均应使用一个新试剂盒,操作前应注意混匀试剂。免疫凝集法测定,精密度较差,CV值一般大于6%。 离子捕获法 亦是新近发展起来的新方法,代表仪器有Abbott的IMX,其原理是糖化血红蛋白与相应抗体结合后,联以荧
[1-3] 。目前比较常用的方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)、免疫分析法和微生物测定法,其中HPLC灵敏、高效,为目前国际上通用的方法,但需要特殊的检测仪器,微生物测定法非常简便,一般实验室均可应用,因而目前使用非常广泛,但其灵敏度不高。免疫分析法是将抗原抗体反应与灵敏的检测系统结合而成的一种简便、快速、敏感的分析方法,目前虽刚起步但具有广阔的应用前景 [4] 。近几年也发展出一些新的检测方法如毛细管电泳法 [5] 和青霉素受体蛋白试验 [6] ,结果也能达
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