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- 细胞线粒体提取纯化
- 上海
- 2026年01月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
蓝基生物(Blue Gene)
- 服务名称：
细胞线粒体提取纯化
- 规格：
50次
背景介绍
本试剂盒根据不同细胞器在沉降系数方面的差异，通过系列离心，搭配试剂盒内特定缓冲溶液获取高度纯化、结构完整的线粒体。
实验采用较温和的方法破碎细胞，将线粒体释放出来。随后用较低的离心力离心去除大部分细胞器，上清用较高的离心力离心沉淀线
粒体。此方法操作简单，能较快获取大量线粒体。
- 结构
线粒体是真核细胞内的双层膜细胞器，一般呈短棒状或圆球状，直径在0.5到10微米左右（因生物种类和生理状态而异）。线粒体由外至内可划分为外膜、膜间隙、内膜和基质四个功能区。外膜比较光滑，内膜则向内褶皱形成线粒体嵴。嵴形状是判断线粒体的重要形态学指标。 - 功能
线粒体是真核生物进行氧化代谢的部位，是糖类、脂肪和氨基酸等进行三羧酸循环和氧化磷酸化的场所，产生的 ATP是生物重要的能量来源。因此，线粒体是细胞产生生物能量，进行有氧呼吸的主要场所，被称之为细胞的“能量工厂。线粒体还可以储存钙离子，可以和内质网、细胞外基质等结构协同作用，从而控制细胞中的钙离子浓度的动态平衡。
线粒体具有独立的DNA。与细胞核DNA不同，线粒体DNA属于母系遗传。与线粒体异常相关的疾病，是一大类遗传代谢病。其临床表现复杂，临床上确诊比较困难，往往需要通过大分子酶学活性检测分析并结合遗传学基因分析的双重手段确定病因。
线粒体作为生物能代谢的主要细胞器，对各种异常代谢和细胞损伤最为敏感。最常见的病理改变可以概括为线粒体氧化磷酸化异常以及线粒体数量、大小和结构的改变。此外，线粒体的损伤和衰老与保健也有着密切的关联。如果能够保持线粒体的完好无损就可以保持细胞的活力，就能够有更强的新陈代谢，也能够抵抗衰老。有关线粒体内外膜活性，电子传递链功能以及线粒体DNA、RNA和蛋白质合成等实验研究一直是生物医学研究的重要内容。而线粒体的完整性对于实验研究的可靠性有着决定性的影响。因此分离提取到较好的线粒体是实验中最为关键的一个环节。
本试剂盒根据不同细胞器在沉降系数方面的差异，通过系列离心，搭配试剂盒内特定缓冲溶液获取高度纯化、结构完整的线粒体。
实验采用较温和的方法破碎细胞，将线粒体释放出来。随后用较低的离心力离心去除大部分细胞器，上清用较高的离心力离心沉淀线
粒体。此方法操作简单，能较快获取大量线粒体。
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文献和实验相关实验
1、收取细胞。2、PBS洗三遍。3、线粒体BUFFER洗一遍。4、线粒体BUFFER(加PMSF)洗一遍。5、分离BUFFER洗一遍。6、匀浆80次。7、1000G取上清。8、10000G弃上清。9、贴壁物即为线粒体。
【基本原理】此试剂盒用于质粒DNA小量纯化。该试剂盒采用了传统的SDS碱裂解法，结合DNA制备膜技术，具有高效、快速、方便之特点，全套操作只需1小时便可完成。使用本试剂盒可从1-4ml 的过夜培养的菌液中纯化得到1～20μg的高纯度质粒DNA，此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。【器材】1．离心机2. Spin Column3. Collection Tube (2ml)*1初次使用试剂盒时，请将RNase A1全部加入到SolutionI中，混合均匀后4℃保存。*2若出现
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