- ￥1680
- 博尔森/BIOESN
- 中国/上海
- BES-20847CL
- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 细胞类型：
见详情说明
- 品系：
见详情说明
- 组织来源：
见详情说明
- 相关疾病：
见详情说明
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见详情说明
- 细胞形态：
贴壁生长
- 器官来源：
见详情说明
- 运输方式：
常温/干冰运输
- 年限：
见详情说明
- 生长状态：
优良
- 规格：
1×106cells/T25培养瓶
1.1离心法
1.1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记，预热好的细胞完全培养基，一支15ml离心管，离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.1.2取出细胞冻存管，在37度水浴中快速解冻，将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中，1000转离心5分钟。
1.1.4倒掉上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶，补充培养基到8ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。
1.2不离心法
1.2.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记，预热好的细胞完全培养基，培养瓶中加入8ml左右培养基。
1.2.2取出细胞冻存管，在37度水浴中快速解冻，将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.2.3将细胞悬液转移到加有培养基的培养瓶中，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养，接种16小时后更换培养基。
2.细胞传代
2.1准备细胞完全培养基，细胞培养瓶，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），DPBS。
2.2弃上清，并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
2.3加入1ml胰酶，室温或者37度消化，直到细胞成片脱落，加入3-4ml完全培养基终止消化，如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
2.4收集细胞悬液，1000转离心5分钟，弃上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
2.5将重悬好的细胞按比例分装至T25细胞培养瓶，补充培养基到8ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。
3.细胞冻存
3.1准备细胞冻存液，细胞冻存管，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），DPBS。
3.2弃上清，并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
3.3加入1ml胰酶，室温或者37度消化，直到细胞成片脱落，加入完全培养基终止消化，如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
3.4收集细胞悬液，1000转离心5分钟，弃上清。
3.5加入冻存液，重悬细胞，并分装到冻存管，冻存密度0.8-1.5×106细胞/ml。
3.6将冻存管放入程序降温盒，并放到-80℃冰箱，过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用，保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异，为了避免细胞不适应，请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养，待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后，前几代及时冻存一些细胞，并最好是可以多冻存几个批次。
细胞系收货须知：
收到的货物会包含以下几种类型，您的货物属于：
□细胞冻存管：收到货物后，请检查箱子里面是否还有干冰。
● 若干冰已剩余不多，不能掩埋冻存管，请及时拍照，并第一时间联系销售。
● 若干冰充裕，可以安排复苏细胞；不安排复苏，请将细胞冻存管转移到液氮进行保存。短期（一周内）的存放可以放在-80冰箱，建议最好保存在液氮中。
□培养瓶的活细胞：收到请检查培养瓶是否完好，是否有漏液，培养基是否浑浊
●若出现以上问题请于当天和我们销售取得联系，我们会第一时间为您处理。
● 若以上问题都没有出现:拆掉培养瓶的外包装，在显微镜下对细胞进行多个视野，不同倍镜拍照。然后用酒精对瓶身进行彻底消毒，放在37度二氧化碳培养箱中进行复温。1-2小时后，拿出在显微镜下观察，并进行多个视野不同倍镜拍照。若细胞达到了可以传代的密度，请及时进行传代。若细胞密度不能进行传代，请回收培养瓶中的培养基，留适量培养基在瓶中，并将培养瓶放在培养箱继续培养即可。
□消化后的细胞悬液：收到请检查管子是否有漏液
●若漏液，请当天和我们销售取得联系，我们会第一时间为您处理。
●若完好，将管子用酒精彻底消毒，收集细胞悬液到离心管，1000转，离心5分钟，弃上清，加入培养基重悬，按照 比例分装到 个T25培养瓶，并补充培养基到 ml即可。
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文献和实验wish细胞是上皮细胞， 人羊膜细胞 ，培养基我用的是最常见的1640（10％小牛血清，加双抗）。1、细胞长满培养瓶时既要传代。我用胰酶和edta的混合液消化。用D-Hank's液配制成0.25%的胰酶。edta的终浓度是0.02%。2、使用前37度预热，每个25ml培养瓶加9滴的胰酶和edta混合液，消化液的量可根据自己培养瓶的大小而定，原则就是能够盖满瓶底。加入胰酶和edta混合液以后，为使酶的活性最大，将培养瓶盖拧紧后放回培养箱中，5分钟左右即用含血清的培养基终止消化。如果在室温情况下消
Gene expression can be analyzed at high spatial resolution via RNA in situ detection methods. For many tissues and species, these will be performed on sections of embedded and fixed plant material. When very small or fragile tissues
实验材料：1. 人胎盘；2. PBSA/GASP：含抗生素的PBSA（庆大霉素，50μg/ml；两性霉素B，1.25μg/ml；链霉素100μg/ml；青霉素100U/ml）；3. 丙三醇；4. 含50%丙三醇的DMEM；5. 胰蛋白酶/EDTA；6. Millicell微孔膜组织培养插片；7. 塑料刮片和无菌棉拭子；实验方法：1. 用PBSA/GASP清洗组织；2. 分离人羊膜，用戴手套的手从胎盘上将羊膜钝性分离下来，分离出的羊膜薄层包括上皮细胞，基底膜和一些基质组织；3. 用无菌棉拭子除去
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