相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 细胞类型:
见详情说明
- 品系:
见详情说明
- 组织来源:
见详情说明
- 相关疾病:
见详情说明
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见详情说明
- 细胞形态:
贴壁
- 器官来源:
见详情说明
- 运输方式:
常温/干冰运输
- 年限:
见详情说明
- 生长状态:
优良
- 规格:
1×106cells/T25培养瓶
1.1离心法
1.1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
1.1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。
1.1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到8ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
1.2不离心法
1.2.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,培养瓶中加入8ml左右培养基。
1.2.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.2.3将细胞悬液转移到加有培养基的培养瓶中,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养,接种16小时后更换培养基。
2.细胞传代
2.1准备细胞完全培养基,细胞培养瓶,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS。
2.2弃上清,并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
2.3加入1ml胰酶,室温或者37度消化,直到细胞成片脱落,加入3-4ml完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
2.4收集细胞悬液,1000转离心5分钟,弃上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
2.5将重悬好的细胞按比例分装至T25细胞培养瓶,补充培养基到8ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
3.细胞冻存
3.1准备细胞冻存液,细胞冻存管,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS。
3.2弃上清,并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
3.3加入1ml胰酶,室温或者37度消化,直到细胞成片脱落,加入完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
3.4收集细胞悬液,1000转离心5分钟,弃上清。
3.5加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度0.8-1.5×106细胞/ml。
3.6将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用,保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次。
细胞系收货须知:
收到的货物会包含以下几种类型,您的货物属于:
□细胞冻存管:收到货物后,请检查箱子里面是否还有干冰。
● 若干冰已剩余不多,不能掩埋冻存管,请及时拍照,并第一时间联系销售。
● 若干冰充裕,可以安排复苏细胞;不安排复苏,请将细胞冻存管转移到液氮进行保存。短期(一周内)的存放可以放在-80冰箱,建议最好保存在液氮中。
□培养瓶的活细胞:收到请检查培养瓶是否完好,是否有漏液,培养基是否浑浊
●若出现以上问题请于当天和我们销售取得联系,我们会第一时间为您处理。
● 若以上问题都没有出现:拆掉培养瓶的外包装,在显微镜下对细胞进行多个视野,不同倍镜拍照。然后用酒精对瓶身进行彻底消毒,放在37度二氧化碳培养箱中进行复温。1-2小时后,拿出在显微镜下观察,并进行多个视野不同倍镜拍照。若细胞达到了可以传代的密度,请及时进行传代。若细胞密度不能进行传代,请回收培养瓶中的培养基,留适量培养基在瓶中,并将培养瓶放在培养箱继续培养即可。
□消化后的细胞悬液:收到请检查管子是否有漏液
●若漏液,请当天和我们销售取得联系,我们会第一时间为您处理。
●若完好,将管子用酒精彻底消毒,收集细胞悬液到离心管,1000转,离心5分钟,弃上清,加入培养基重悬,按照 比例分装到 个T25培养瓶,并补充培养基到 ml即可。
本产品仅用于科学研究使用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验「外泌体 + 环状 RNA」国自然双热点助力肿瘤研究发表高分文章
的外泌体能促进 CRC 的增殖、迁移和侵袭 作者从两种 CRC 细胞系(HCT116和SW480)上清中分别分离获得外泌体,经过透射电镜、NTA 和 WB 鉴定后,确认已分离出外泌体。随后,作者用外泌体处理对应的 CRC 细胞,发现外泌体能显著促进 CRC 细胞增殖、迁移和侵袭,并减少凋亡。 WB 结果也显示,外泌体能提升 CRC 细胞中 BCL-2、 N-cadherin、Vimentin、MMP9 蛋白水平,和降低 E-cadherin、Cleaved-caspase3、Cleaved
感激。。。 fangweibin119 蛋白定量后上样量一致吗? 内参做了没有? 一顿饭 一你可以搜索本版内有关p-ERK WB的相关帖子,相信你会找到不少可以提高阳性率的注意事项; 二是我没有用过hela系细胞株。但如果你找得到SW480(结肠癌)细胞株,是一个非常好的阳性对照,一秒钟曝光,条带强得一塌糊涂....... 祝好运! bigrabbit 不知道你是如何处理细胞
腺瘤细胞 SMMC-7721 人肝癌细胞 SW 13 人肾上腺皮质瘤 SW480 人结直肠癌 T84 人结肠癌细胞 TALL104 IL-2依赖株(B类) TF1 人红系白血病细胞(B类) THP1 人单核细胞型淋巴瘤 U-2 OS 人骨肉瘤细胞 U251 人神经胶质细胞瘤 U-937 人淋巴瘤细胞 UACC812 人乳腺导管瘤 UT-7 人类原巨核细胞白血病细胞(B类) ZR-75-1 人乳腺导管癌
技术资料暂无技术资料 索取技术资料





