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文献和实验流式课堂 | 易被忽略的 CD4、CD8 共表达细胞——胸腺淋巴细胞
做过流式实验的同学，对 CD4、CD8 这两个指标都不会陌生。检测 CD4+ T 细胞和 CD8+ T 细胞分型，是流式中最常见的实验之一。 通常，我们会先检测 CD3，来圈总T淋巴细胞，再分别用 CD4 抗体和 CD8 抗体，来区分 CD4+ T 淋巴细胞（辅助或调节性T细胞）和 CD8+ T 淋巴细胞（细胞毒性 T 细胞）。 新生小鼠脾脏细胞 上图为新生小鼠脾脏细胞进行的 CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC 三色流式实验结果。从图中可以看出，在新生小鼠脾脏中，绝大部分细胞
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息： MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit（BioLegend, Cat#480009），阴性分选试剂盒2.检测仪器型号：BD LSRⅡ3.样本：正常人外周血4.分选前后检测相关产品：PE-CD4（Biolegend, Cat# 317410）5.实验过程（1）采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。（达优，Cat#DKW-KLSH-0100
CD4细胞及CD8细胞的分离： （1）CD4细胞的分离：将一定量的T细胞悬液通过一根SephDdexC—10柱，然后用少量的RPMll640培养洗涤，收获的细胞悬液约含85%的CD4细胞。医学|教育|网搜集整理 （2）CD8细胞分离：用Tris缓冲液稀释羊抗鼠IgG（浓度为10μg/m1）包被一平皿表面，然后放置4℃过夜，没有包被上的抗体用PBS洗净。然后将已标记有抗CD8单克隆抗体的T细胞（细胞浓度为1×l07/m1）3m1加入上述的平皿内，4℃放置2小时，用PBS
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