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文献和实验反差强,是目前较好的ISHH与ICC结合法。详细程序如下: (1)将切片漂浮于能经受高压灭菌的器皿中。0.1mol/l PBS pH7.2冲洗3×5min。 (2)0.1mol/L甘氨酸PBS冲洗5min。 (3)0.4% Triton X-100 PBS 15min。 (4)1μg./ml蛋白酶K(0.1mol/l Tris HCl pH8.0, 50mmol/L EDTA 配),37℃保温30min。 (5)4%多聚甲醛PBs 5min。
有500ml、250ml、100ml 等几种。 (2)培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml 等几种。 (3)培养皿:用于开放式培养及其它用途。分直径30mm、60mm、120mm 等几种。 (4)吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管。其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度
净化工作台及二氧化碳培养箱、离心机、倒置显微镜等。缓冲间可放置电冰箱、冷藏器及消毒好的无菌物品等。 (3)操作间:普通培养箱、离心机、水浴锅、定时钟、普通天平及日常分析处理物品。 (4)洗刷消毒间:烤箱、消毒锅、蒸馏水处理器及酸缸等。 (5)分析间:显微镜、计算机及打印机等。 3、培养器皿 细胞培养以玻璃器皿为主,常准备最需使用量的三倍。器皿应选择透明度好、无毒、中性硬度玻璃制品。常用的玻璃器皿有下面几种。 (1)液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常以500ml
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