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999
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麦格生物
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现货
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文献和实验效率 = = 5 X 105cfu/μg 21)筛库完成,菌在SD/-Trp/-Leu/-His+30mM3-AT 平板上生长7-14 天后,会有阳 性克隆生长出来,阳性克隆一般大于3mm。挑取少量菌做膜检(方法见3)。 从膜检变蓝的酵母菌中抽提prey 质粒与Bait 质粒做共转验证。 2.4.2 筛选小文库 2.4.2.1 转化法 1)5~10 个2mm 克隆接种于2ml SD/-Trp 液体培养基中,摇20 小时(过夜),至 OD600=1.2 左右。
培养瓶(100ml);培养皿;离心管(10ml)移液管(10ml与1ml);漏斗;10层纱布;三角锥瓶(100ml);吸耳;酒精灯;酒精(75%);碘酒(3%);火柴;瓶塞;镊子;滤器及配套滤膜(25mm直径 孔径0.22um);50ml注射器;烧杯;蛋座;记号笔;离心管架;金属饭盒;照蛋器。 2.2 实验仪器 仪器名称 产地 超纯水仪 Water pro ps.labconco 电子天平 ShangpingFA2004. 上海天平仪器厂 高压灭菌仪 HIRAYAMA4 双蒸水仪
3离心后. 离心管内分为三层. 上层为血浆和PBS液. 下层主要为红细胞和粒细胞。中层为淋巴细胞分离液. 在上层中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层. 为淋巴细胞和单核细胞和少量血小板的混合物。 4用1 Ml吸管插到云雾层. 吸取单个核细胞。置入另一15 Ml离心管中. 加入5倍以上体积的PBS. 1 500 rp M×10 Min. 洗涤细胞两次。 我的心得: 第2步. 一定要缓慢添加
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