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文献和实验超过一个月。如果一次无法用完一 瓶,可将40~45 ml 分装于无菌50 ml 离心管中,由于血清结冻时体积会增加约10 %,必须预留此膨胀体积之空间,否则易发生污染或容器冻裂之情形。 2.一般厂商提供之血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。 3.瓶装(500ml) 血清解冻步骤(逐步解冻法): -20℃ 或–70℃ 至4℃冰箱溶解一天,至室 温下全溶后再分装,一般 50 ml 无菌离心管可分装40~45 ml。在溶解过程中须规则
1mM EDTA 0.5M:100µl 鲑鱼精DNA 100µg/µl 10mg/ml:50µl ddH2O溶解至45ml,与5ml 1%BSA 混合,定容至50ml水中。 洗膜液I(磷酸系统) 100ml BSA 0.5% 0.5g EDTA 1mM 0.5M:200µl NaHPO4(PH7.2) 40mM 1M:4ml SDS 5% 20%:25ml 洗膜液II(磷酸系统) 100ml EDTA 1mM 0.5M:200µl NaHPO4(PH
.3gTris,188g甘氨酸,10gSDS,用蒸馏水溶解至1000ml,临用前稀释10倍。PH8.3 9、 转移缓冲液: 2.9g甘氨酸、5.8gTris碱、0.37g SDS(可不加),200ml甲醇(临用前加),加水至总量1L。 10、 丽春红染液储存液:丽春红S 2g 三氯乙酸30g 磺基水杨酸 30g 加水至100ml 用时上述储存液稀释10倍即成丽春红S使用液。使用后应予以废弃。 11、 脱脂奶粉5%(w/v)。 12、 NaN3 0.02% 叠氮钠(有毒,戴手套操作),溶于磷酸
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