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文献和实验的,目前没有听说过用在除菌的,要用这种过滤器的话用了还不如不用,他们在生产过程中的操作会有很多萃取物,反而对液体造成污染!而国产的膜是可以在自己处理过后用来除菌的,一般用两张滤膜,孔径一大一小这样可以保护滤膜本身的张力结构不会发生变化而使滤膜孔径变大!如果考虑到经费少的问题可以买可换膜的滤器,可以反复使用的!现在国产的滤器中JET的是可以的,他们用是MILLIPORE的膜,相对进口产品性价比高些!3.怎样正确使用国产的可重复用小滤器 丁香园网友bengbu_bli的观点为: (1) 新买的国产滤器
美国JRH公司EX-CELLTM 302无血清培养基配制方法
使用孔径为0.45um复合0.20um的低蛋白结合能力的双层滤膜进行过滤,推荐使用德国赛多利斯公司的醋酸纤维素材质(CA)的过滤器。 12. 为防止CO2丢失,推荐使用蠕动泵或惰性气体(例如氮气)以提供2~15 psi的正压;不要使用CO2气体; 13. 需要添加L-谷氨酰胺的,在培养液使用前添加20 ml/L的200mM浓度的L-谷氨酰胺溶液(JRH订货号59202),使其工作浓度达到4 mM。 14. 在无菌条件下分装培养液到合适的无菌容器中,培养液要低温
,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了;比如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途——因为经不起多次“折磨”。选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。另外还要注意选择纯的NC膜——混有含醋酸纤维
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