Bioland MO-96-4 微孔板恒温振荡器

肿瘤成球实验以及肿瘤球体增殖/活力检测方案

简介 实体瘤以三维(3D)空间构象生长，导致氧和营养物质以及其他物理和化学应力的异质性暴露。为了模拟三维空间构象，在肿瘤研究中普遍使用三 维体外培养模型。肿瘤干细胞 (CSC) 是指肿瘤内具有自我更新能力的那一小部分细胞，常常在化疗治疗后驱动肿瘤恶变和复发。传统上，肿瘤干细胞会从癌细胞系和肿瘤活检组织中分离出来，并在三维肿瘤球状体悬浮培养物中生长。 本实验方案描述了一种以 96 孔球形微孔板制备和培养肿瘤球状体的基本方法。这种基础培养和测定实验方案适用于所有球形微孔板。表 2 提供了将 96

血中甲状腺素的放射免疫测定

，1000 ?l)、测定管、试管架、防水记号笔、恒温水浴锅、试管振荡器、蠕动泵、离心机、冰箱。 [实验方法和步骤] 1.制备被检样品： 取血待凝固后，分离血清或取抗凝血液经3000r· min-1离心10 min，分离血浆。 2.将测定管编号，零标准空白管（Bo）和空白管（N）各为三管，T4不同浓度标准管（20、40、80、160、320 ng·ml-1）和样品管（S）均为双管平行。 3.各管按操作程序表(表

质粒DNA的提取

链彼此已完全分开，不能迅速而准确地复性，它们缠绕形成网状结构。通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来，而质粒DNA却留在上清液中。 [仪器、材料与试剂] (一)仪器 1．恒温培养箱 2．恒温摇床 3．小型高速离心机 4．高压灭菌锅 (二)材料 1．带有pQE-31质粒和pUC18-CAT质粒的两株大肠杆菌 2．1.5mL 离心管 3．枪头、枪 (三)试剂 质粒