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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8°C
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Phenol:Chloroform:Isoamyl Alcohol 25:24:1, Saturated with 10mM Tris, pH 8.0, 1mM EDTA
- 库存：
999
- 供应商：
香港吉斯恩贝国际贸易有限公司
- 规格：
100ML/400ML
| 规格： | 100ML | 产品价格： | ￥648.8 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 400ML | 产品价格： | ￥1760.0 |
DNA提取液,Ph≥7.8产品说明书
【产品说明】
本试剂是由几种有机溶剂组成的混合物，主要用于基因组 DNA 的提取等试验。抽提剂可以使蛋白质变性，同时利用 RNA、DNA、蛋白质三者的性质差别来分离得到 DNA。抽提离心后的上层为含 DNA 的水相、中间为变性蛋白相，下层为溶剂相。
静置后产品有分层，是正常现象。上层十分之一体积为保护液，不可使用，不可去除，直接吸取下层使用。
本产品含有由我公司研制开发的有机分离试剂成分，其可代替有毒的氯仿，可以达到和氯仿相似的核酸分离效果。同时该产品不会产生有毒的光 QI，无酸化效应保质期更长，密封保存条件下有效期可达一年。但该产品出厂半年后可能会出现提取效率下降的情况，超过半年的产品请酌情使用。该产品对温度敏感，请 2-8℃冷藏保存。
【保存】 2-8℃保存。
【有效期】6 个月。
【注意事项】
1. 如发现变为红色或棕色，表明已发生氧化，不能继续使用。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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用户评价
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文献和实验使用苯酚抽提细胞 DNA 时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了 DNase 的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与 DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而 DNA 溶于水相。
氯仿的作用是克服酚的缺点；加速有机相与液相分层。最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的迹量酚。（酚易溶于氯仿中）
用酚-氯仿抽提细胞基因组 DNA 时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含 DNA 的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。
培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
可以用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。该方法往往被用于贴壁细胞的转染，也是最好的方法。 1. 试剂的配制 (1)2×HBS 1.63 g NaCl ；1.19g Hepes；0.023 g Na2 PO4 ·2H2 O；加水至100 ml pH 7.1 过滤，4℃保存 (2)2mmol/L CaCl2 过滤除菌 (3)TE：0.1mmol/L EDTA，1mmol/L Tris-HCL PH 8.0 (4)G418(新霉素G418)液：1g G418溶于
(24:1)各抽提1次（10,000 rpm，4℃离心5 min） 10.取上清，1/10V 3M NaAc,2.5V体积的无水乙醇, -70℃沉淀30 min以上 11.沉淀用75%乙醇漂洗，风干, 溶于200 ulTE中，-20 ℃保存备用 DNA提取液：0.2M Tris-HCl（pH 7.5），0.5M NaCl，0.01M EDTA，1％SDS， 3M NaAc TE：10 mmol/L Tris-HCl pH8.0，1 mmol/L EDTA 酚（pH8.0）:氯仿:异戊醇
技术资料
