LongTaq Kit | 货号 | 规格 |
| P3062 | 1 ml×5（200次，50 μl/次） |
产品组分P3062
2×Long Taq Reaction Mix 1 ml 1支×5
LongTaq DNA聚合酶（2.5 U/μl） 100 μl 1支
PCR Enhancer 1 ml 1支注： 本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中
包含溴酚蓝的包装。
保存条件 -20℃保存2年。
请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。
产品说明本产品是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有LongTaq DNA聚合酶、dNTP混合物、缓冲液等PCR扩增必需组分（模板与引物除外）。使用时，仅需将反应缓
冲液与LongTaq DNA聚合酶按比例混合后，在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染（加样次数减少）。同
时，由于体系内含有优化剂与增强剂，能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有两种末端：平末端与3’-dA突出末端。
LongTaq DNA聚合酶的保真性是Taq DNA聚合酶的3倍，简单模板的扩增长度可达40 kb。在扩增复杂模板（如GC-rich或重复序列）时，LongTaq DNA聚合酶的扩增效率显著高于
Taq DNA聚合酶，特别适合复杂模板的PCR扩增。扩增产物具有两种末端：平末端与3’-dA突出末端。
产品特点使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
可重复：降低污染和加样错误风险。
DNA聚合酶用量灵活可控。
产品用途长链复杂模板PCR扩增
高通量长链复杂模板PCR扩增
高重复性长链复杂模板PCR扩增
制备TA克隆用PCR产物
活性定义 一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
质量控制 相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，
扩增活性无明显改变。
2×Long Taq Reaction Mix的组分 100 mM KCl
20 mM Tris-Cl
3 mM MgCl
2 400 mM dNTP混合物
溴酚蓝
dd H
2O
酶贮存液 20 mM Tris-HCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
100 mM KCl
0.5 % TW 20
0.5 % NP 40
50 % Glycerol
应用举例注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
以λ DNA为模板，扩增8 kb片段。 λ DNA（2.5 ng/μl） 1 μl
Primer 1（10 μM ） 2 μl
Primer 2（10 μM） 2 μl
2×Long Taq Reaction Mix 25 μl
LongTaq DNA聚合酶（2.5 U/μl） 0.5 μl
dd H
2O 补足至50 μl
反应条件95℃ 3 min
95℃ 30 sec
55~68℃ 30 sec 30 Cycles
72℃ 8 min
72℃ 5 min
备注1 建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
2 LongTaq Kit的扩增产物有两种末端：平末端和3’-dA突出末端。要提高克隆效率，建议PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆。
3 PCR Enhancer有效增加聚合酶的热稳定性，同时对DNA的变性也有良好作用。当难于获得扩增产物时，每25μl体系可添加2-8 μl增强剂，其他扩增条件与程序
不变。
4 模板DNA推荐用量（50 μl PCR反应体系）
人类基因组DNA 0.1 – 1 μg
λDNA 0.5 – 5 ng
质粒DNA 0.1 – 10 ng
大肠杆菌DNA 10 – 100 ng
