首页 / 试剂 / PCR/RT-PCR / SYBR Green qPCR Mix(1ml*5)

SYBR Green qPCR Mix(1ml*5)

收藏

SYBR Green qPCR Mix(1ml*5)

丁香通采购保障计划,让您的采购更放心。 查看详情

  • 商家诚信度 
  • 入驻年限  5年
  • 广州市天河区燕岭路89燕侨大厦912

站内推广

  • 货号: P2092
    保质期: 2年
    数量: 大量
    保存条件: -20℃
    供应商: 东盛生物
    规格: 1 ml×5
    ● 试用品规格:100微升
    ● 试用品数量:10
    ● 是否包邮:是,除港澳台等地区
    ● 试用名额筛选要求:无

    SYBR Green qPCR Mix
    产品组分
    组分 P2092
    2×SYBR Green qPCR Mix 1 ml×5
    超纯水 1 ml×5

    ●  P2092可进行500次反应(20μl标准PCR反应体系,每次使用10μl)。
     
    质量控制
    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;
    功能测试:qPCR分析扩增的特异性、敏感性与可重复性。
     
    保存条件
    -20℃避光保存2年。

     
    产品说明
    SYBR Green qPCR Mix是2×浓缩的实时定量PCR扩增的预混合溶液,含有Hotstart Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液、SYBR® Green Ⅰ等扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时,仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行实时定量PCR。本产品与绝大多数厂商的实时荧光定量PCR仪兼容,如Applied Biosystems、Eppendorf、Corbett、Bio-Rad和Roche。
    Hotstart Taq DNA聚合酶采用了基于核酸适配子 (aptamer) 的抑制剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的扰。这种基于核酸适配子的抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时强抑制聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在72℃时TaqDNA聚合酶即能被激活,无需另外的高温温育步骤。采用这种双重热启动Taq DNA聚合酶进行PCR扩增,能够获得更高的扩增效率、特异性。

    应用举例---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
    反应体系 
     样本溶液                                     <100ng
     Primer 1(10 μM)                         0.4μl
     Primer 2(10 μM)                         0.4 μl
     2×SYBR Green qPCR Mix                 10μl
     dd H2O                                 补足至20 μl
     
    如果溶解曲线出现杂峰,可以减少Mix用量
    特异性反应体系
     样本溶液                                    <100ng
     Primer 1(10 μM)                         0.4μl
     Primer 2(10 μM)                        0.4 μl
     2×SYBR Green qPCR Mix                  8μl
     dd H2O                                 补足至20 μl
     
    如果对痕量模板的检出率低,可以增加Mix用量
    高灵敏反应体系
    样本溶液                                      <100ng
     Primer 1(10 μM)                         0.4μl
     Primer 2(10 μM)                        0.4 μl
     2×SYBR Green qPCR Mix                12μl
     dd H2O                                 补足至20 μl

    反应条件三部法
    94℃    3min
    95℃    15s
    60℃    15s
    72℃    20s
    ×40Cycles(data collection)
    *Aptamer在60℃时会抑制酶活性,72℃完全释放酶活性,东盛推荐三步扩增程序,不建议两步法扩增。

    注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
    1.将SYBR Green qPCR Mix设定为总反应体积的1/2,其他的反应组分请参照 最优条件进行调整。 最优条件确定后,如需改变反应体系总体积,各个组分按相同比例改变。
    2.引物最佳终浓度为0.2-0.6 μM。引物浓度越高,扩增效率越高,但添加量过高则可能引起非特异的扩增而导致实验失败。
    3.在进行反应体系配置时,通常除待检样品之外的组份预混成n+x倍(n为样品数,x为分注损耗)的混合液,然后分注到各管,最后在每管中分别加入相应的待检样品液。
    4.Aptamer在60℃时会抑制酶活性,72℃完全释放酶活性,东盛推荐三步扩增程序, 不建议两步法扩增。
    5.本产品依赖温度激活DNA聚合酶,低温时抑制酶活性,高温时激活酶活性, 均在极短时间完成。每一步PCR都会有低温抑制高温激活的效果,所以特异性更好。不需要PCR反应前95℃ 10min加热激活,使酶活下降,影响PCR扩增效率、定量精度。Aptamer是合成的化学物质,与Taq抗体hotstart法相比不会引入外源DNA污染。
    6.模板的添加量通常在100ng以下,不同来源的DNA,最好进行梯度稀释,确定最佳模板量。

    仪器选择指南




    东盛SYBR® Green qPCR Mix扩增等倍浓度质粒扩增曲线
     

    东盛SYBR® Green qPCR Mix扩增等倍浓度质粒溶解曲线

    备注:
    1  建议在冰上配置PCR 反应液后,再放入实时荧光定量PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性,减少非特异性扩增,得到良好的PCR结果。
    2  因本产品含有SYBR® Green I,使用或保存时避免长时间强光照射。
    3  配制反应液的过程中,请用新的枪头、离心管,以免交叉污染。
    4  反应体系中引物、模板的用量,请根据实际情况优化。同时,本产品附带的MgCl2方便调整体系镁离子的浓度。
    5  本品与ABI产品的使用程序有一定差异,使用时请重新调整程序,达到良好的特异性及灵敏度。
    6  模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)
        人类基因组DNA       0.1 μg ---1 μg
        λDNA              0.5 ng---5 ng
        质粒DNA             0.1 ng-10ng
        大肠杆菌DNA          10 ng-100 ng
    温馨提示:不可用于临床治疗。

    资料下载:

    SYBR Green qPCR Mix.pdf 附件下载 (下载 9 次)

  • SYBR Green qPCR Mix(1ml*5)

    * 联系人
    * 电话
    * 验证码
    换一个

    填写更多信息,方便商家更快联系你 展开

    采购截止时间
    数量
    单位
    单位/学校
    职位
    地址
    详细地址
    邮箱
    0/120

询价发送成功

会在1个工作日内联系您!

马上登录注册,即可保存询价历史

你可能感兴趣的产品