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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
DC2.4
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨
- 肿瘤类型:
.
- 细胞类型:
详见说明
- 品系:
详见说明
- 组织来源:
骨髓;树突状细胞;C57BL/6
- 相关疾病:
详见说明
- 物种来源:
第四军医大
- 免疫类型:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 是否是肿瘤细胞:
.
- 器官来源:
骨髓;树突状细胞;C57BL/6
- 运输方式:
常温或者干冰
- 年限:
详见说明
- 生长状态:
贴壁
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |
显微镜下部分细胞产品的形态:
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文献和实验养BMDC有好几个月了,看了2、3篇文献就开搞,发现论坛里还是有一些战友养这个。就想开个专题讨论贴,请新手老手都上来谈谈经验或者问些问题。集思广益,大家相互促进下。 我在论坛里看到因为有战友养DC看百把篇文献的,感到佩服又奇怪,就BMDC的培养我目前只知道有个经典版本和改良版本。 我用的是改良版本,参考文献改天附上(可能养这个的战友大多看过了)。 1. 取小鼠股骨胫骨,小鼠要年轻!(6W-8W,以前用只一年左右的养出来外形也张牙舞爪,但流式检测没有CD11c表达,很奇怪
83。人DC2来源于CDl4-CDllc-IL-3Ra+(CDl23)前体细胞,在11;3存在下分化为DC。表面标志为CD4+CD45RA+CDl23+ILT3+1LTl―CDllc-Lin-,外周血和骨髓的DC2还表达BDCA-2和BDCA-4。由于pDC提呈抗原的能力差,刺激T细胞增殖的能力弱,因此能诱导CD4T细胞无能。LDC受到不同刺激后,能产生大量IFN-a、IFN-p,可能与控制病毒复制或活化其他T细胞有关。 小鼠DC和人类DC类似但有所不同.主要包括髓系来源
树突状细胞( DC )的来源及分化成熟 人树突状细胞起源于造血干细胞(hemopoieticstemcell)。DC的来源有两条途径:①髓样干细胞在GM-CSF的刺激下分化为DC,称为髓样DC(myelioddendriticcells,MDC),也称DCl,与单核细胞和粒细胞有共同的前体细胞;②来源于淋巴样子细胞,称为淋巴样DC(1ymophioddendriticcells,LDC)或浆细胞样DC(plasmacytoidDC,piX;),即DC2,与T细胞和NK细胞有共同











