PKH67GreenFluorescentCellLinke

PKH 不适合染外泌体？看看文献怎么说

​亲脂性荧光染料分子如PKH家族已被广泛用于外泌体标记。有研究使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）系统地评估了PKH标记对外泌体尺寸的影响，所有被PKH标记外泌体的尺寸均明显增加[1]，并引入了假阳性结果[3]，故认为PKH不是示踪外泌体的可靠技术。   PKH容易引入假阳性   PKH可在四个方面引起假阳性：   1. 染料聚集造成的假阳性   研究表明，PKH的聚集会在体系中引入了新的非外泌体纳米颗粒。如下图（Fig.1）PKH（不含EV）在NTA下观测

文献解读：一个表格让你全懂 PKH 标记外泌体！

PKH标记外泌体过程中形成了大量PKH纳米颗粒，在大小，表面积和荧光强度方面与标记的外泌体几乎没有区别。同时，PKH26纳米颗粒会被原代星形胶质细胞吞噬到与PKH26标记的外泌体相似的亚细胞区室。总之，PKH类染料用于外泌体标记会导致假阳性信号，并严重影响外泌体的鉴定和细胞摄取实验的真实性。   常用方法不能有效去除PKH纳米颗粒，且外泌体损耗大 残留的PKH颗粒会造成细胞摄取假阳性结果  

外泌体标记方法干货分享，4 种标记法任你选

主要分为两大类，第一类是 PKH67（绿色荧光）/PKH26（红色荧光），由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合，所以染色效果较好，应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料，包括DiI（橙色荧