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人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗体(VZV-IgG)定量检测试

剂盒(ELISA)
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  • ¥699 - 999
  • 羽翔
  • 6.25 ng/ml – 200 ng/ml
  • 最低检出剂量小于 1.0 ng/ml
  • 中国
  • EYX-DDL00269
  • 2025年07月15日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 灵敏度

      最低检出剂量小于 1.0 ng/ml

    • 样本

      血清、血浆、细胞培养上清液中人水痘带状疱疹

    • 标记物

      IgG 抗体(VZV-IgG)的浓度

    • 适应物种

    • 应用

      科研

    • 检测方法

      间接法酶联免疫吸附

    • 检测范围

      6.25 ng/ml – 200 ng/ml

    • 库存

      大量现货

    • 供应商

      浙江羽翔生物科技有限公司

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥699.0
    规格:96T产品价格:¥999.0
    定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗
    体(VZV-IgG)的浓度。
    使用试剂盒前,必须仔细阅读本说明书。
    实验原理
    本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗
    体(VZV-IgG)捕获抗原的微孔酶标板中,加入人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗体(VZV-IgG)校
    准品和待测样本,再加入另一株 HRP 标记的抗人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗体(VZV-IgG)抗体
    (酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗原-
    抗体-酶标抗体的复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M
    硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪 450nm 波长上测定吸光度(OD 值),吸光度(OD
    值)与待测样品中人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗体(VZV-IgG)的浓度正相关。拟合校准品曲线,
    可以计算出样本中人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗体(VZV-IgG)的浓度。
    试剂盒限制性
    1、仅供科研使用,不得用于临床诊断。
    2、在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不得使用。
    3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
    4、使用试剂盒配套的样品稀释液。
    5、如果样本值高于最高标准品浓度值,请将样本适当稀释后,再重新测定。
    6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。
    7、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
    技术提示
    1、混合蛋白溶液时,避免起泡。
    2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,
    避免交叉污染。
    3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。
    4、使用自动洗板机时,加入一个 30 秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。
    5、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。
    6、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄
    色。
    7、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
    8、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温
    育操作。
    试剂盒组分与保存
    未开封的试剂盒保存在 2-8 度,不得使用过期试剂盒。
    产品细节图片1
    校准品浓度依次为:200、 100、 50、 25、 12.5、 6.25 ng/ml
    其他用品
    1、酶标仪(450nm)
    2、精密移液器及一次性吸头
    3、蒸馏水
    4、洗瓶或者自动洗板机
    5、37℃水浴锅或恒温箱
    6、500ml 量筒
    生物安全
    1、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃
    物都应按照传染物进行处置。
    2、试剂盒的液体组分中,含有 proclin-300 防腐剂,可能引起皮肤过敏反应,避免吸入烟雾
    与皮肤接触。
    3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入烟雾。
    4、戴上防护手套,实验完成后彻底洗手。
    样品的采集和储存
    以下只是列出样品采集和保存的一般指南。所有样本采集保存过程中,不得使用叠氮NA
    做为防腐剂。
    1、细胞培养上清:4000rpm 条件下离心 20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃
    以下,避免反复冻融。
    2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm 条件下离
    心 20min,小心地分离出血清,保存在-20℃以下,避免反复冻融。
    3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在 4000rpm 条件下,离心 20 分钟取上清,
    血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。
    样本收集后,无法一次检测完毕,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温
    下解冻,确保样品均匀充分解冻。
    4、组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。
    将剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1: 9 的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应 9 mL
    的 PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶抑制
    剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行
    超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液 5000×g 离心 5-10 分钟,取上清检测。
    5、细胞提取液:贴壁细胞用冷的 PBS 轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 离心 5 分钟
    后收集细胞;悬浮细 胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的 PBS 洗涤 3 次。每 1×106 个
    细胞中加入 150-200μLPBS 重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少 PBS 的体
    积)。将提取液于 1500×g 离心 10 分钟,取上清检测。
    6、其他生物体液:1000×g 离心 20 分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
    试剂准备
    1、使用前,所有的组分都要至少复温 120min,确保充分复温到室温。
    2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结
    晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按 1:20 稀释,即 1 份的浓缩洗涤液,添加 19 份的蒸
    馏水。
    3、底物:底物液 A 和 B,在使用前,按 1:1 体积充分混合,混合后 15 分钟内使用。
    操作程序
    所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
    1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
    2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
    设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL,0 值
    孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。
    3、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体
    100μL。
    4、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 60min。
    5、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水
    纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡
    30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分
    拍干反应板。
    6、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反
    应板,37℃水浴锅或恒温箱避光温育 15min。
    7、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD 值)。
    结果计算
    1、 以标准品浓度做为横坐标(6 个标准品孔,加 1 个 0 值孔,共 7 个浓度点),对应的吸光
    度(OD 值)作为纵坐标,利用计算机软件,采用四参数 Logistic 曲线拟合(4-pl),创
    建标准曲线方程,通过样本的吸光度(OD 值),利用方程计算样品的浓度值。
    2、 如果样品被稀释,通过上述方法测的浓度值,要乘以稀释倍数,才是样品的最终浓度。
    产品细节图片2
    试剂盒性能指标
    1、物理性能
    试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破
    损漏气。
    2、剂量反应曲线线性
    校准品剂量反应曲线相关系数 r 值,大于等于 0.9900。
    3、精密度
    批内精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在同一个板块内精度评估。
    批内变异系数 CV%小于 10%。
    批间精密度:三组已知的高、中、低浓度样品,进行二十次在不同板块内精度评估。批
    间变异系数 CV%小于 15%。
    4、灵敏度
    最低检出剂量小于 1.0 ng/ml。
    5、回收率
    三组已知的高、中、低浓度样品,进行五次在同一个板块内回收率评估,回收率在 85%-115%
    之间。
    6、特异性
    本试剂盒识别天然和重组人水痘带状疱疹病毒 IgG 抗体(VZV-IgG),与结构类似物无交
    叉。
    7、稳定性
    2℃-8℃保存,有效期 6 个月。
    8、 检测范围
    6.25 ng/ml – 200 ng/ml。
     
     

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