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100u
重组SUMO酶
产品货号: :FrdE0007
储存温度: -20℃
来源 : E.coli。
1. 产品简介
SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。
2. 产品特性
| 中文别名(Chinese synonym) |
SUMO蛋白酶 |
| 英文别名(English synonym) |
SUMO Protease |
| 来源(Source) |
大肠杆菌表达 |
| 标签(label) |
多聚His标签 |
| 纯度(Purity) |
经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度> 90% |
| 分子量(Molecular weight) |
26.55 kDa |
| 缓冲液组分(Buffer) |
500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT |
活力单位:30℃,SUMO Protease 1小时酶切2ug含有酶切位点的融合蛋白,酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U。
3. 使用方法
3.1. 在EP管中配制如下反应体系(建议)
| 组分 |
体积 |
| 融合蛋白 |
20 μg |
| 10X SUMO Protease Buffer |
20 μL |
| ddH2O |
to 190 μL |
| SUMO Protease |
10 μL
|
| Total volume |
200 μL |
3.2. 30℃孵育,在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液,置于单独的EP管中。
3.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
3.4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取40 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,延长反应时间,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。
表1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性
| 反应时间(h) |
不同温度下剪切活性(%) |
|||
| 4℃ |
16℃ |
25℃ |
30℃ |
|
| 0.5 |
48 |
73 |
83 |
88 |
| 1 |
60 |
87 |
90 |
93 |
| 2 |
71 |
94 |
94 |
95 |
| 3 |
74 |
95 |
95 |
95 |
4. 储存条件
长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃。
5. 产品优势
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
*本试剂仅供实验室研究使用
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