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重组SUMO酶
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100u
产品货号: :FrdE0007
储存温度: -20℃
来源 : E.coli。
1. 产品简介
SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。
2. 产品特性
中文别名(Chinese synonym)
SUMO蛋白酶
英文别名(English synonym)
SUMO Protease
来源(Source)
大肠杆菌表达
标签(label)
多聚His标签
纯度(Purity)
经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度> 90%
分子量(Molecular weight)
26.55 kDa
缓冲液组分(Buffer)
500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT
活力单位:30℃,SUMO Protease 1小时酶切2ug含有酶切位点的融合蛋白,酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U。
3. 使用方法
3.1. 在EP管中配制如下反应体系(建议)
组分
体积
融合蛋白
20 μg
10X SUMO Protease Buffer
20 μL
ddH2O
to 190 μL
10 μL
Total volume
200 μL
3.2. 30℃孵育,在0.5、1、2、3小时分别吸出30 μL上述反应液,置于单独的EP管中。
3.3. 向上述EP管中加入30 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
3.4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取40 μL进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,延长反应时间,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。
表1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性
反应时间(h)
不同温度下剪切活性(%)
4℃
16℃
25℃
30℃
0.5
48
73
83
88
1
60
87
90
93
2
71
94
95
3
74
4. 储存条件
长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃。
5. 产品优势
无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。
纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
*本试剂仅供实验室研究使用
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