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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
3个月
- 供应商:
上海研生
- 规格:
500ml
注意事项:
1、本产品经0.22μm过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;
2、本产品为浓缩液,请根据需要稀释后使用;
3、2℃~8℃中解冻,混匀后使用,切忌反复冻融,用量较少时建议分装冻存;
4、2℃~8℃中保存12个月内有效;
5、本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。
注意事项:
a.尽量减少反复冻融的次数,以免失效。 b.基因转染到细胞内要一段时间才能表达出蛋白质, 所以筛选不能太早。
c. 筛选也不宜太迟,一般要在转染24h之后才开始加G418筛选。因为转染了外源基因 的细胞代谢负荷较大,增值较慢,时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没,最终导致筛选不出阳性克隆。
4. 随着细胞代谢,G418的浓度和活性都会下降,应每3~5天更换一次含有G418的筛选液,这时药物浓度可以降至200μg/ml。
5.加药筛选约5~7天左右,细胞会大量死亡,为了减少死亡细胞对阳性克隆的不利影响以及增加阳性克隆的得到率,可以应用套环法或刮除法结合有限稀释法来筛选阳性克隆。加药后,在高倍镜下,刮除阴性克隆,消化阳性克隆后继续筛选培养。或者用套环套住阳性克隆,在套环内加胰蛋白酶或EDTA消化,把消化液吸到另外一个新的孔中培养,最后再用有限稀释法把阳性克隆在96孔板中筛选。 6. 一般经过4周左右的筛选,得到的阳性克隆都比较稳定。但是外源基因如果没有整合到基因组中的话,目的基因还是很容易丢失的,再次筛选往往是必不可少的,经过2次以上的筛选之后才能找到遗传稳定的细胞克隆。
7.尽量避免污染。
8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
免疫学试剂:
PBS(0.01mol/L,pH7.2-7.4)、PBST、抗荧光淬灭封片剂、甘油明胶封固液、中性树胶、柠檬酸钠抗原修复液(50×)、Tris-EDTA抗原修复液、ELISA洗涤液、ELISA包被缓冲液、ELISA封闭液、免疫染色一抗稀释液、荧光抗体稀释液、TMB底物显色试剂盒。 固定液:多聚(4%) 、中性福尔马林固定液(10%)、环保组织固定液(即用型)、Carnoy固定液、Bouin's固定液、等。
脱钙液:甲酸脱钙液、脱钙终点检测试剂盒等。
班氏试剂、斐林试剂、罗斯试剂、Molisch试剂、Seliwanoff试剂、Tollen试剂、Griess试剂、醋酸白试剂、血红蛋白检测试剂盒、活化部分凝血活酶时间(APTT)检测试剂盒、优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒、尿蛋白检测试剂盒、尿本-周氏蛋白定性检测试剂盒、粪便隐血定性检测试剂盒、脑脊液总蛋白检测试剂盒、总蛋白检测试剂盒、植物总糖和还原糖检测试剂盒、葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)、乳酸检测试剂盒、铁(钙、磷)检测试剂盒、尿素/尿酸检测试剂盒、总胆固醇(TC)检测试剂盒、肝素钠检测试剂盒、维生素C检测试剂盒、碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒、乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒、淀粉酶(AMS)检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)检测试剂盒、总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒、过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒等。 G418溶液(geneticin,20mg/ml)
10706 Mueller-Hinton 琼脂 250g/瓶 用于细菌药敏试验
11816 MH 肉汤 250g/瓶 用于稀释法进行药敏试验
11820 四环素族检定培养基 250g/瓶 用于四环素族抗生素残留检测
11216 AK 琼脂 2 号 250g/瓶 用于检测牛奶和乳制品中抗生素残 留时孢子液制备
12164 HTM 培养基 250g/瓶 用于副嗜血杆菌纸片扩散法药敏试 验,每升培养基中需添加 15mg 无 菌 NAD
10134 溴紫葡萄糖蛋白胨培养基 250g/瓶 用于鲜乳中抗生素残留检验
10266 LB 琼脂LB 250g/瓶 含 0.5%NaCl,用于分子生物学中大 肠杆菌的培养
10267 NZCYM 肉汤 250g/瓶 用于大肠杆菌菌株培养,配方被推 荐用于重组l噬菌体的复制
10268 NZYM 肉汤 250g/瓶 不含酸水解酪蛋白,用于大肠杆菌 菌株培养,配方被推荐用于重组l 噬菌体的复制
10269 Luria 肉汤基础 250g/瓶 含 0.05%NaCl,用于大肠杆菌的培 养和保存,视需要每 1L 培养基中无 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液
10270 Luria 琼脂基础 250g/瓶 含 0.05%NaCl,用于大肠杆菌的培 养和保存,视需要每 1L 培养基中无 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液
10271 2×YT 培养基 250g/瓶 用于重组大肠杆菌菌株的培养
10272 M9 低盐培养基 250g/瓶 用于制备 M9 低盐培养基,培养重 组大肠杆菌菌株
10274 麦康凯琼脂基础 250g/瓶 不含碳水化合物,用于大肠杆菌的 发酵研究
10275 低限肉汤(不含葡萄糖) 250g/瓶 用于分离和表现营养突变型大肠杆 菌和枯草芽孢杆菌的特性
10276 低限琼脂 250g/瓶 用于分离和表现营养突变型大肠杆 菌的特性
10277 SOC 培养基 250g/瓶 用于基因工程大肠杆菌的培养
10278 SOB 培养基 250g/瓶 用于大肠杆菌分子遗传学菌株的培 养
Earle's平衡盐溶液 10279 肉汤Terrific 250g/瓶 用于大肠杆菌培养
10280 选择性 APS 肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于分子生物学试 验中大肠杆菌的保存和培养
10281 选择性 APS 超级肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于培养重组大肠 杆菌菌株,提高质粒产量
11148 YPD 琼脂 250g/瓶 用于分子生物学实验中酵母菌的培 养和保存
11149 YPD 肉汤 250g/瓶 用于分子生物学实验中酵母菌的培 养和保存
12111 K 氏培养基 250g/瓶 用于饮料中耐热耐酸菌的检测,需 使用苹果酸调节 pH
10710 肝浸液培养基 250g/瓶 用于布鲁氏菌属分离
10711 胰蛋白胨琼脂培养基 250g/瓶 用于布鲁氏菌属检验
12103 阿须贝氏(Ashby)培养基 250g/瓶 用于固氮菌的培养
12105 根瘤菌培养基 250g/瓶 用于根瘤菌的保藏和培养
12106 硅酸盐细菌培养基 250g/瓶 用于硅酸盐细菌的培养
12107 固氮(茎瘤)根瘤菌培养基 250g/瓶 用于(茎瘤)根瘤菌培养
12109 联合固氮菌培养基 250g/瓶 用于固氮螺菌的培养
12110 光合细菌培养基 250g/瓶 用于光合细菌的培养
12144 胱氨酸乳糖无电解质培养基 250g/瓶 无抑制性,用于泌尿系统致病菌的分离和培养,也可做深部培养的贮 运
12145 包姜氏琼脂培养基 250g/瓶 用于百日咳杆菌的分离,需添加 1%甘油和 15%脱纤维羊血 50701
12147 纤维素分解菌培养基 250g/瓶 用于纤维素分解菌的分离和鉴别, 纤维素分解菌周围有红色分解圈
12159 脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵琼脂基础 250g/瓶 用于脑膜炎奈瑟氏菌糖发酵试验
12161 幽门螺杆菌琼脂培养基 250g/瓶 用于幽门螺杆菌的分离培养,需添 加抗生素及马血
12401 碎肉培养基 250g/瓶 用于痤疮杆菌的培养,不含维 生素 K,需添加 11002(庖肉牛肉 粒)
11943 黄原胶液体发酵培养基 1 万 ml/包 以葡萄糖为碳源,用于黄原胶
12501 Tinsdale 琼脂基础 250g/瓶 用 于 白 喉 杆 菌 的 分 离 培 养 , 每100ml 培养基中需添加 10ml 血清 以及 1 支 22501
22501 Tinsdale 琼脂基础添加剂 5ml×10 支/盒 每支用于 100ml12501 中
12502 亚碲酸钾血琼脂基础 250g/瓶 用于白喉杆菌的分离培养,需添加 亚碲酸钾及羊血
12309 吡哆醇 Y 培养基 100g/瓶 用于吡哆醇测定
12601 Korthof 培养基 250g/瓶 用于钩端螺旋体的增菌培养,每 100ml 培养基中需添加兔(羊、或 马)血清 8ml
12610 EMJH 培养基 250g/瓶 用于钩端螺旋体的增菌培养,每 90ml 培养基中添加 1 支 22601
12173 发根农杆菌培养基 250g/瓶
大肠杆菌显色培养基 1000ml 用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时,显兰色
大肠菌群显色培养基 1000ml 用于快速、准确检测大肠菌群大肠菌群培养24小时,显兰色
大肠杆菌/大肠菌群显色培养基 1000ml 用于快速、准确同时检测大肠杆菌和大肠菌群,培养24小时,大肠杆菌显紫色,大肠菌群显红色
TBX 培养基 1000ml 用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时,显兰色
细菌总数显色培养基 250 用于快速、准确检测细菌总数,培养24小时,细菌显红色
O157显色培养基 1000ml 用于O157菌的显色培养
标准溶液的配制:
1.直接配制法 对于纯净的物质(称做基准物质)可准确进行称量,用蒸馏水溶解后,转移到一定容积的容量瓶中稀释至标线,溶液的准确浓度可以直接计算出来。溶质的纯度、性质等对浓度有较大影响,为此,对用来直接配制标准溶液用的基准物质必须具备以下条件: (1)物质的纯度要高,含量不得低于99.9%,杂质的含量应当少到可以忽略的程度。 (2)物质的分子组成应与其化学式完全符合,包括结水合物中的结品水含量也必须与其化学式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。
(3)性质稳定,贮蔵时应不发生变化,不易吸收空气中的水分、二氧化碳等气体而改变其成分,不易风化潮解和被空气氧化,烘干时不易分解等。此外最好使用分子量较大的基准物质以减小称量误差。
2.间接配制法 凡不符合基准物质条件的物质,可先配制成近似所需浓度的溶液,再用基准物质溶液或能与其发生定量反应的标准溶液进行滴定,求其准确浓度,这种通过滴定来确定准确浓度的操作叫做“标定”。间接法配制近似浓度溶液时不需用分析天平称量和容量瓶配制,可用台秤、量筒等器皿。将称好的物质转移到干净的试剂瓶中,先加少量蒸馏水将其溶解,继续用量筒加蒸馏水至需要量即可。由于大多数试剂不符合基准物的条件,故间接法配制标准溶液是经常的。如固体NaOH因易吸收空气中的水分而潮解和吸收CO2使表面变质;浓盐酸因易挥发而无法准确称量;高不易得到分析纯级的试剂等,这些物质的标准溶液须用间接法来配制,经标定后再做标准溶液使用。
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文献和实验NaHCO3 浓度的 Earle's 平衡盐溶液,并且由培养箱维持 5~10% CO2。通常,1.2~2.2g/L NaHCO3 配合 5% CO2,3.7 g/L NaHCO3 配合 10% CO2。精确的计量因培养基配方而不同。除了 Leibovitz's L-15 (ATCC No.30-2008),ATCC 所有培养基都要匹配 5% CO2。绝大多数 ATCC 培养基含 1.5g/L NaHCO3 以及额外的丙酮酸钠。而 Gibco Hyclone 很多品牌的培养基里都含有 3.7 g/L
更换 1 次)冻存:95% 培养液 + 5% DMSO 冻存于液氮。3. vero 细胞Vero 细胞被成功的用来培养狂犬病疫苗、乙脑疫苗等多种疫苗,在非典期间又为研究冠状病毒做出贡献,在医药研究种广泛应用。来源: 非洲绿猴肾细胞形态:上皮细胞生长特性:贴壁注释:该细胞是日本千叶大学的 Y. Yasumura 和 Y. Kawakita 于 1962 年 3 月 27 日从一只正常的成年非洲绿猴肾组织培养出来的。培养液:MEM(含 2 mM L - 谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g
及提供简单的营养。主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。最简单的BSS是Ringer。D-Hank"s与Hank"s的一个主要区别是前者不含有Ca2+、Mg2+,因此D-Hank"s常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有较高的NaHCO3(2.2g/L),适合于5%CO2的培养条件,Hank"s平衡液仅含有0.35g/L NaHCO3,不能用于5%CO2的环境,若放入CO2培养相,溶液将迅速变酸,使用时应注意。 配制溶液应使用双蒸水或去离子水 。如果配方中含有Ca
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