人TBP基因核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

人TBP基因核酸检测试剂盒（荧光PCR法）客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
    10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM）   
              2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
  1 μl      加ddH2O至 50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

SP-R(Mouse substance P receptor) ELISA Kit  小鼠P物质受体     96T
大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA Kit  大鼠的牛血清白蛋白残留检测     96T
F II ELISA Kit  大鼠凝血因子Ⅱ     96T
SP(Mouse Substance P) ELISA Kit  小鼠P物质     96T
FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit  人胚胎性硫糖蛋白抗原     96T
BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit  人本周蛋白     96T
VIP(Mouse Vasoactive Intestinal Peptide) ELISA Kit  小鼠血管活性肠肽     96T
ET ELISA Kit  大鼠内毒素     96T
PPAR- Gamma ELISA Kit  大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ     96T
TPO(Mouse Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit  小鼠甲状腺过氧化物酶     96T
CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin) ELISA Kit  人癌胚铁蛋白     96T
AFU(Mouse alpha-L-fucosidase) ELISA Kit  小鼠αL岩藻糖苷酶     96T
SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit  人鳞状细胞癌相关抗原     96T
CsA ELISA Kit  大鼠环孢素A     96T
hs-CRP ELISA Kit  大鼠超敏C反应蛋白     96T
TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit  人肿瘤特异性抗原     96T
BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit  小鼠血管舒缓激肽     96T
PI(Mouse Proinsulin) ELISA Kit  小鼠胰岛素原     96T
MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit  人黑色素瘤转移表面黏附分子     96T
Beta2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit  大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M     96T
EMAb ELISA Kit  大鼠抗子宫内膜抗体     96T
BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit  人乳腺癌易感蛋白2     96T
(Mouse anti-IgE receptor antibody) ELISA Kit  小鼠抗IgE受体抗体     96T
ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit  人凋亡信号调节激酶I     96T
(Mouse anti-IVIgG antibody) ELISA Kit  小鼠抗IVIgG抗体     96T
LDL-IC ELISA Kit  大鼠低密度脂蛋白免疫复合物     96T
人TBP基因核酸检测试剂盒（荧光PCR法）15-LO/LOX ELISA Kit  大鼠15脂加氧酶     96T
BAX(Human Bcl-2 associated X protein) ELISA Kit  人Bcl-2相关X蛋白     96T
AMA(Mouse Anti-myocardial antibody) ELISA Kit  小鼠抗心肌抗体     96T
TF(Human Transfer factor) ELISA Kit  人转移因子     96T
Tn- I ELISA Kit  大鼠肌钙蛋白Ⅰ     96T
/CER(Mouse Ceruloplasmin) ELISA Kit  小鼠铜蓝蛋白     96T
SAA ELISA Kit  大鼠血清淀粉样蛋白A     96T
CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit  人结肠癌抗原     96T
p53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit  小鼠p53     96T
cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit  小鼠环磷酸鸟苷     96T
Human H-ras ELISA Kit  人H-ras     96T
Hpt/HP ELISA Kit  大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白     96T
Alpha1-AGP ELISA Kit  大鼠α1酸性糖蛋白     96T
NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠合成酶     96T
Human c-sis ELISA Kit  人c-sis     96T
iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠诱导型合成酶     96T
eNOS-3 ELISA Kit  大鼠内皮型合成酶3     96T
Human c-jun ELISA Kit  人c-jun     96T
Human c-fos ELISA Kit  人c-fos     96T
eNOS(Mouse Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠内皮型合成酶     96T

实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的： 1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。 2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。