戊型肝炎病毒核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）

戊型肝炎病毒核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
    10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM）   
              2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
  1 μl      加ddH2O至 50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
Tie1(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1) ELISA kit  人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1     96T
ANG-2(Human Angiopoietin 2) ELISA Kit  人血管生成素2     96T
ANG-1(Human Angiopoietin 1) ELISA Kit  人血管生成素1     96T
ANG(Human Angiogenin) ELISA Kit  人血管生长素     96T
ANG- II (Human angiotension II ) ELISA Kit  人血管紧张素Ⅱ     96T
Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit  人帕金森氏病2Parkin     96T
VCL(Human vinculin) ELISA Kit  人纽蛋白     96T
Ntn4(Human Netrin-4) ELISA Kit  人轴突生长诱向因子4     96T
Ntn1(Human Netrin-1) ELISA Kit  人轴突生长诱向因子1     96T
REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit  人再生基因蛋白IV     96T
VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit  人多功能蛋白聚糖     96T
NFKB p65 (Human NF-κΒ p65) KLISA Kit  人细胞核因子/k基因结合核因子     96T
ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit  人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4     96T
Human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit  人类似RIKEN cDNA 4933429F08 基因     96T
PAQR7(Human progestin and adipoQ receptor family member VII ) ELISA Kit  人孕酮和adipoQ受体家族成员Ⅶ     96T
COLEC11(Human collectin sub-family member 11) ELISA Kit  人集蛋白亚家族成员11     96T
Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit  人丝氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子进化枝3G     96T
Human Homocysteine(Hcy) ELISA Kit  人血浆同型半胱氨酸     96T
Human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit  人类似RIKEN cDNA 3110050K21 基因     96T
戊型肝炎病毒核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit  人类似RIKEN cDNA 2610307008 基因     96T
human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA KIT  人类似RIKEN cDNA 2010109K09 基因     96T
RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B) ELISA Kit  人ras同源物基因家族成员b     96T
Human hypothetical protein LOC677340 ELISA Kit  人假定蛋白LOC677340     96T
Human hypothetical protein LOC433328 ELISA Kit  人假定蛋白LOC433328     96T
MYD88(Human myeloid differentiation primary response gene 88) ELISA Kit  人髓样分化因子初次应答基因88     96T
Ifi205(Human interferon activated gene 205) ELISA Kit  人干扰素活化基因205     96T
H2-K1(Human Histocompatibility 2-K1-K region) ELISA Kit  人组织相容性2-K1-K 区     96T
LILRB4(Human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit  人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4     96T
CLEC4E(Human C-type lectin domain family 4 member e) ELISA Kit  人C型凝集素结构域家族4成员E     96T
Human Hypothetical protein LOC677168 ELISA Kit  人假定蛋白LOC677168     96T
Ly6a(Human lymphocyte antigen 6 complex locus A) ELISA Kit  人淋巴细胞抗原6复合物基因座A     96T

产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的： 1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。 2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。