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100
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上海研生
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48T 0.1PCR管
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
荧光定量PCR原理:
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
性别决定区Y框蛋白1(SOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 1 (SOX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
性别决定区Y框蛋白2(SOX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
性别决定区Y框蛋白3(SOX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 3 (SOX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
激肽释放酶9(KLK9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kallikrein 9 (KLK9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
视网膜钙黏附蛋白(RCAD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin, Retinal (RCAD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
GATA结合蛋白3(GATA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for GATA Binding Protein 3 (GATA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
α-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein (aHSP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
粘蛋白1(MUC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mucin 1 (MUC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
性别决定区Y框蛋白18(SOX18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 18 (SOX18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
弹性蛋白微原纤维界面因子1(EMILIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
早期生长应答因子1(EGR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Early Growth Response Protein 1 (EGR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
鞘磷脂脂质蛋白1(PLP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Proteolipid Protein 1, Myelin (PLP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
髓鞘关联糖蛋白(MAG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myelin Associated Glycoprotein (MAG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
土豆内源基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)八聚体结合转录因子4(OCT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Octamer Binding Transcription Factor 4 (OCT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
生长分化因子9(GDF9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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文献和实验埃博拉病毒Z亚型核酸荧光PCR检测试剂盒 荧光探针PCR RNA 25T、48T 埃博拉病毒Z、S亚型双重核酸荧光PCR检测试剂盒 荧光探针PCR RNA 25
测量和鉴别非常微量的特异性核酸,从而可通过监测 CT 值而实现对原始目标基因的含量定量。实时荧光定量 PCR 法最大的优点是克服了终点 PCR 法进入平台期或叫饱和期后定量的较大误差,实现 DNA/RNA 的精确定量。 该技术不仅实现了对 DNA/RNA 模板的定量,而且具有灵敏度和特异性高、能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点,该技术在医学临床检验及临床医学研究方面有着重要的意义。 microRNA 实时荧光定量 PCR 的技术特点 虽然 microRNA 实时
荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简要叙述。一、特点FQ-PCR不仅具有普通PCR的高灵敏性,而且由于荧光探针的应用,可以通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果,所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱技术
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