双歧杆菌(BD)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)

双歧杆菌(BD)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

HDLEC tRNA人真皮淋巴内皮细胞总RNA10 μg
HEK tRNA人表皮角质细胞总RNA10 μg
HEK-a tRNA人表皮角质细胞-成人总RNA10 μg
HEM-l tRNA人表皮黑色素细胞-浅色素总RNA10 μg
HEM-m tRNA人表皮黑色素细胞-中色素总RNA10 μg
HEM-d tRNA人表皮黑色素细胞-深色素总RNA10 μg
HDF-f tRNA人真皮成纤维细胞-胎儿总RNA10 μg
HDF-n tRNA人真皮成纤维细胞-新生儿总RNA10 μg
HDF-a tRNA人真皮成纤维细胞-成人总RNA10 μg
HHDPC tRNA人毛乳头细胞总RNA10 μg
HHGMC tRNA人生发基质细胞总RNA10 μg
HHORSC tRNA人毛囊外根壳细胞总RNA10 μg
HHIRSC tRNA人毛囊内根壳细胞总RNA10 μg
HLEC tRNA人淋巴内皮细胞总RNA10 μg
HLF tRNA人淋巴成纤维细胞总RNA10 μg
HOK tRNA人口腔角质细胞总RNA10 μg
HGF tRNA人牙龈成纤维细胞总RNA10 μg
HPLF tRNA人牙周膜成纤维细胞总RNA10 μg
HEEpiC tRNA人食道上皮细胞总RNA10 μg
HESMC tRNA人食道平滑肌细胞总RNA10 μg
HIMEC tRNA人肠微血管内皮细胞总RNA10 μg
HISMC tRNA人肠平滑肌细胞总RNA10 μg
HCSMC tRNA人结肠平滑肌细胞总RNA10 μg
HPMEC tRNA人肺微血管内皮细胞总RNA10 μg
HPAEC tRNA人肺动脉内皮细胞总RNA10 μg
HPASMC tRNA人肺动脉平滑肌细胞总RNA10 μg
HPAF tRNA人肺动脉成纤维细胞总RNA10 μg
HPAEpiC tRNA人肺泡上皮细胞总RNA10 μg
HBEpiC tRNA人支气管上皮细胞总RNA10 μg
HTEpiC tRNA人气管上皮细胞总RNA10 μg
HSAEpiC tRNA人小气道上皮细胞总RNA10 μg
HPF tRNA人肺成纤维细胞总RNA10 μg
双歧杆菌(BD)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)HBSMC tRNA人支气管平滑肌细胞总RNA10 μg
HTSMC tRNA人气管平滑肌细胞总RNA10 μg
HSkMC tRNA人骨骼肌细胞总RNA10 μg
HSkMSC tRNA人骨骼肌卫星细胞总RNA10 μg
HSkMM tRNA人骨骼肌成肌细胞总RNA10 μg
HRGEC tRNA人肾小球内皮细胞总RNA10 μg
HRPTEpiC tRNA人肾近曲小管上皮细胞总RNA10 μg
HRCEpiC tRNA人肾皮质上皮细胞总RNA10 μg
HREpiC tRNA人肾上皮细胞总RNA10 μg
HRMC tRNA人肾系膜细胞总RNA10 μg使用方法：
注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
1.样本处理（样本处理区）
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。 2.加样（样本处理区）
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。
荧光定量PCR原理：
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR，后来也叫Real-Time PCR，是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理：随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言，荧光扩增曲线可以分成三个阶段：荧光背景信号阶段，荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。而在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系，根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段， PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便，在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念：荧光阈值和 CT值。