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100
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上海研生
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50T
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荧光定量PCR原理:
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。
Mouse Anti-human IgG(3D3)/FITC FITC标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Gold 胶体金标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.5ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy3 Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5 Cy5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5 Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy7 Cy7标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE PE标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy3 PE-Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-CY5 PE-CY5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/APC APC标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy7 PE-Cy7标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/HRP 辣根过氧化物酶标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Bio 生物素标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml
BSA (bovine serum albumin) 牛血清白蛋白(第五组分) 5g
KLH (keyhole limpet hemocyanin) 血蓝蛋白 10mg
OVA (ovalbumin) 鸡卵白蛋白 10mg
THY (thyroglobulin,TG) 甲状腺球蛋白 10mg
HSA/human Serum albumin 人血清白蛋白 10mg
Hu Fibrinogen 人纤维蛋白原 10mg
Streptavidin, SA 链霉亲和素 1mg
牛冠状病毒(BCV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)Protein G/FITC FITC标记蛋白-G 0.5ml
Protein A 蛋白A 1mg
GST-Tag protein 重组谷胱甘肽-转移酶 0.5mg
Cholesterol 胆固醇 100g
Beta-Amyloid(1-16) β淀粉样肽1-16(多肽蛋白) 0.5mg
Beta-Amyloid (31-35) β淀粉样肽31-35(多肽蛋白) 0.1mg
Beta-Amyloid(1-28) β淀粉样肽1-28(多肽蛋白) 0.5mg
Beta-Amyloid(1-40) β淀粉样肽(1-40)(多肽蛋白) 0.1mg
A Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突变型β淀粉样肽1-40 0.1mg
A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β淀粉样肽1-40(结构改造) 0.1mg
A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀粉样肽29-40(野生型) 0.1mg
A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀粉样肽29-42(野生型) 0.1mg
Beta-Amyloid (1-42) β淀粉样肽(1-42) 0.1mg
Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉样肽25-35(多肽) 1mg
Beta-Amyloid 1-42 CT β淀粉样肽 1-42 (C端多肽) 0.1mg
Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽) 0.5mg
APP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉样肽前体蛋白(多肽抗原) 0.5mg
Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14) 神经保护肽 0.5mg
Amylin(1-37) amide 糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽 0.5mg
C peptide (cyclic citrullinated peptide,C) 瓜氨酸环肽 0.5mg
C peptide (cyclic citrullinated peptide,C) 瓜氨酸环肽 0.5mg
特点优势:
1. 特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。 6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是zui末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
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文献和实验是一项新型的核酸扩增技术,一小时内可以检测出IHHNV结果。广州双螺旋基因技术有限公司根据恒温PCR原理,研发出Dhelix-C水产病害检测仪,配合使用恒温荧光法IHHNV核酸检测试剂盒,在65°C的恒温条件下反应,利用Bst DNA聚合酶完成置换扩增。反应体系中含有荧光染料,Dhelix-C水产病害检测仪能通过光学软件检测扩增后荧光信号的变化,将荧光信号表达为扩增曲线,同时仪器自动判读检测结果,从取样到结果显示仅需1~2个小时,仪器操作简单,非专业背景人员也可以轻松掌握,更适用于对虾IHHNV现场
9 新型冠状病毒(SARS)核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒 达安、匹基 … 10 神经管畸形基因检测(PCR—RFLP)试剂盒
一种用于肝素粗品质量监测的、检测原料药中反刍动物DNA的多重RT-PCR分析方法的开发
动物源污染的实时荧光定量PCR技术。该检测法由一套针对反刍动物(牛、绵羊、山羊)和猪的冻干引物、探针及扩增内标组成。该方法经过两处分析机构验证:第一个位于FDA,第二个位于某州独立实验室。肝素钠多重实时荧光定量PCR(hMRTA)检测方法性能通过了美国FDA兽药中心研发处制定的特异性、灵敏度和专一性严格验收标准。符合早前建立的饲料中反刍动物原料多重实时荧光定量PCR检测法的灵敏度和重复性要求。hMRTA法检测猪源肝素钠粗品,98%达灵敏度,真阳性98%、假阴性2%。PCR检测法检测三个反刍动物物种,可作
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