异嗜性白血病病毒(X-MuLV)核酸检测(荧光-PCR法)

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  • 2025年07月13日
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      上海研生

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      50T

    异嗜性白血病病毒(X-MuLV)核酸检测(荧光-PCR法)实验外包:
    1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
    2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
    3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
    4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
    5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
    6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
    7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
    8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
    Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1)  细胞激酶信号-1抑制剂(抗原) 0.5mg
    SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain)  心肌肌凝蛋白多肽 0.5mg
    Alpha-Synuclein  核突触蛋白(抗原) 0.5mg
    Alpha-Synuclein  核突触蛋白(抗原) 0.5mg
    CA15-3 peptide  乳腺癌相关抗原抗原 0.2mg
    Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1)  P物质受体(抗原) 0.5mg
    p-Caldesmon(phosphor-Ser789)  磷酸化钙介质素抗原 0.5mg
    NK-2R peptide  神经激肽A受体(多肽抗原) 0.5mg
    Calpain 1  钙蛋白酶(多肽) 0.5mg
    Tanis/SELS (Selenoprotein S)又称SELS  炎症负调控因子蛋白(抗原) 0.5mg
    Tau protein  微管相关蛋白(抗原) 0.5mg
    Telomerase (TE)  端粒酶(催化亚单位)(多肽抗原) 0.5mg
    TGF-Alpha (Ttansforming Growth Factor –Alpha)  转移生长因子–α(抗原) 0.5mg
    CaMK2a(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II alpha)  钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗原 0.5mg
    Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG)  钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗原 0.5mg
    TGF- Beta1 (Ttansforming Growth Factor – Beta1)  转移生长因子–β1(抗原) 0.5mg
    CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita)  钙/钙调素依赖蛋白激酶2b抗原 0.5mg
    CAP1/Park7/DJ-1  Park7/DJ-1/CAP1抗原 0.5mg
    CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2)  环化酶相关蛋白CAP-2抗原 0.5mg
    TGF beta 2 Propeptide  转移生长因子–β2前体肽 0.5mg
    异嗜性白血病病毒(X-MuLV)核酸检测(荧光-PCR法)TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3)  转移生长因子–β3(抗原) 0.5mg
    TGF- Beta R2 peptide  转移生长因子β受体2(多肽抗原) 0.5mg
    Thymosin Alpha-1  胸腺肽 α-1 (胸腺肽-Thymosin alpha-1) 0.5mg
    Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽) 0.5mg
    Caspase-12(hunman)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗原(人) 0.5mg
    TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2)  胶质细胞系源性神经营养因子(多肽) 0.5mg
    TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha)  人肿瘤坏死因子-α(多肽抗原) 0.5mg
    rh-TNF-Alpha(rh-Tumor Necrosis Factor alpha)  重组人肿瘤坏死因子 100ug
    rh-TNF alpha protein GST Tagged  重组人肿瘤坏死因子 100ug
    TRA16  睾丸激素受体相关蛋白 0.5mg
    rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag)  重组人白介素-1受体拮抗剂 100ug
    rhBMP-2/BMP2  重组人骨形态发生蛋白-2 100ug
    rh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7)  重组人骨形态发生蛋白7 100ug
    储存条件:
    14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
    1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
    3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
    4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
    5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
    异嗜性白血病病毒(X-MuLV)核酸检测(荧光-PCR法)
    使用方法:
    注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
    1.样本处理(样本处理区)
    待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
    2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
    取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
    组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
    1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区)
    3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
    荧光定量PCR原理:
    荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。

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