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- Roche
- 11684795910
- 2025年12月31日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海觅拓生物科技有限公司
- 保存条件：
-20
- 规格：
50 TESTS
sufficient for ≤50 tests
质量水平
100
mfr. no.
Roche
运输
dry ice
储存温度
−20°C
相关类别
一般描述
广泛使用的方法用于确定凋亡，包括基于琼脂糖凝胶电泳的基因组DNA分析以及基于3H-胸苷或5-溴-2′-脱氧-尿苷的DNA片段检测。该方法包含在特定的细胞群中将片段化的低分子量DNA与未片段化的高分子量DNA进行分离。因此，这些方法并不提供关于在特定细胞群或特别是组织切片中某个独立细胞命运的信息。或者，独立的凋亡细胞可能因其特征性的核染色质堆叠和片段而可通过显微镜进行识别，但这种方法具有主观性并受限于形态发生最大变化这一相对窄的时间窗口。凋亡的标志是DNA的降解，而这在早期是对核小体间DNA连接体区域是有选择性的。DNA的切割可能会产生双链和单链的DNA断裂（切口）。两种类型的断裂都可在酶促反应中利用修饰的核苷酸（如生物素-dUTP、DIG-dUTP、荧光素-dUTP）的游离3′-OH端标记而被检测到。这些酶末端转脱氧核苷酰酶（TdT）可催化脱氧核糖核苷酸的模板非依赖性聚合至单链及双链DNA的 3′-末端。这种方法也被称之为TUNEL(TdT-介导的 dUTP-X 缺口 末端标记)。或者，游离的3′-OH基团可能通过一种称为切口翻译的模板依赖机制而利用DNA聚合酶被标记。然而，TUNEL法被视为更为敏感且快速的。
试剂盒用于在单细胞水平对凋亡进行检测和定量，基于对DNA链断裂的标记（TUNEL技术）；通过荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。
特异性
TUNEL反应倾向于对在凋亡过程中产生的DNA链断裂进行标记。这能够将凋亡与坏死以及由细胞增殖抑制药物或放射诱导的主要DNA链断裂进行区分。应用
该原位细胞死亡检测试剂盒，荧光素法是一种精准、快速并简便的非放射性技术用于在细胞和组织中利用流式细胞仪通过荧光显微镜和定量检测在单细胞水平对凋亡的细胞死亡进行检测和定量。因此，该原位细胞死亡检测试剂盒可用于多种不同的检测系统。举例包括：
- 在基础研究中对冷冻及福尔马林固定组织切片中独立的凋亡细胞进行检测
- 在癌症研究中对恶性细胞对药物诱导凋亡的敏感性进行测定
- 通过双染过程对异质性细胞群中正在经历细胞死亡的细胞进行分析
特点和优势
- 灵敏：使用荧光素-dUTP进行的直接标记过程可降低背景标记
- 快速：荧光素-dUTP的使用使得能够在TUNEL反应后直接对样本进行分析
- 便捷：无需二级检测系统
- 准确：在分子水平（DNA链断裂）进行凋亡识别并对处在凋亡极早期的细胞进行识别
包装
1个试剂盒包含2种组分。制备说明
工作溶液：将全部体积（50 μl）的酶溶液加入至剩下的450 μl标记溶液以获得500 μl TUNEL反应混合物。充分混合以平衡组分。
其他说明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。仅试剂盒组分
产品编号说明
- Enzyme Solution (TdT)
- Label Solution (fluorescein-dUTP)
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文献和实验免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）是一种以抗原抗体特异性反应为基础，对组织或细胞中特定抗原（通常是蛋白质）的定性和定位分析的实验方法。免疫组化可以在微观层面上反映出疾病过程中细胞内蛋白质的表达变化，对于病理诊断和研究具有重要价值。通常，根据显色剂（酶、荧光素、同位素、 金属离子等）与样品类型的不同，将免疫组化作以下分类。 图 1 免疫组化病理分类 IHC/ICC（统称为免疫组化）是指通过酶标记物在组织、细胞原位通过抗原抗体反应和化学的显色反应，对特定抗原进行定性和定
（In situ cell death detection kit-POD法）一、 原理：TUNEL（TdT-mediated dUTP nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素（fluorescein）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下，可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端，并与连接辣根过氧化酶（HRP，horse-radish peroxidase）的荧光素
荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization,FISH）
的核苷酸片段所组成，可由克隆到噬菌体和质粒中的染色体特异大片段获得；3）特异性位置探针，由一个或几个克隆序列组成。探针的荧光素标记可以采用直接和间接标记的方法。间接标记是采用生物素标记DNA探针，杂交之后用藕联有荧光素亲和素或者链霉亲和素进行检测，同时还可以利用亲和素-生物素-荧光素复合物，将荧光信号进行放大，从而可以检测500bp的片段。而直接标记法是将荧光素直接与探针核苷酸或磷酸戊糖骨架共价结合，或在缺口平移法标记探针时将荧光素核苷三磷酸掺入。直接标记法在检测时步骤简单，但由于不能进行信号
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