- ￥1200
- 赫澎生物
- YX-C-ZDT
- 上海
- 2025年11月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
6个月
- 供应商：
赫澎生物
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50T/48S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：YX-C-ZDT规格：50T/48S 产品内容：
试剂一：12mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：无水乙醇，自备。
试剂三：浓硫酸，自备。
标准品：粉剂 10mg×1 支，4℃避光保存。
产品说明：
分光光度法
利用水提醇沉法提取总多糖，苯酚-硫酸法测定总多糖含量。
自备仪器和用品：
分析天平、分光光度计、台式离心机、可调式移液器、比色皿、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。操作步骤：
一、总多糖提取样本烘干粉碎，称取约 0.05g 样本，加入 1mL 水，充分匀浆。100℃水浴提取 2h（必须盖紧盖子防止水分流失），冷却后 10000g 离心 10min，取上清。吸取 0.2mL 上清，慢慢加入 0.8mL 无水乙醇，混匀后 4℃静置过夜， 10000g 离心 10min，弃上清，沉淀中加入 1mL 水，充分混匀溶解沉淀。
二、测定步骤
1、酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 490nm。2、称 1mg 标准品用 1mL 蒸馏水溶解，浓度为 1mg/mL。取适当溶液配制浓度为1mg/mL、0.5mg/mL、0.25mg/mL、0.125mg/mL、0.0625mg/mL 的标准品
（蒸馏水进行稀释）。取 1.5mL EP 管吸取 200µL 标准品，加入 100µL 试剂一和 0.5mL 浓硫酸，混匀后 90℃水浴 20min，流水冷却。取 750µL 加入比色皿， 于 490nm 下测定吸光值A。根据吸光度（x）和浓度（y，mg/mL） 做出标准曲线。
3、吸取 200µL 上清，加入 100µL 试剂一和 0.5mL 浓硫酸，混匀后 90℃ 水浴 20min，流水冷却。取 750µL 加入比色皿，于 490nm 下测定吸光值
△A。
三、总多糖含量计算
根据标准曲线，将样品△A 带入公式中（x），计算出样品浓度 y（mg/mL）。（1） 按样本鲜重计算
总多糖（mg /g 干重）=5y÷W
V 样总：上清液总体积，mL；V 样：加入反应体系中上清液体积，20μL=0.02 mL；W：样品质量，g ；样本体积已被稀释五倍，T。
注意事项：
- 如果样品吸光值A 大于大浓度标准品吸光值，需要将样本用蒸馏水稀释，计算公式中再乘以相应稀释倍数。
- 由于浓硫酸具有强腐蚀性，请谨慎操作
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文献和实验IC50，关于LD50的方法与此相似！（5）在线求IC50或EC50：http://chiryo.phar.nagoya-cu.ac.jp/javastat/JavaStat-j.htm结果统计学处理所有数值以x±s表示，应用SPSS软件进行方差分析，pexcel表中可以做两两比较的T-test,这个你可以参考一下；你的数据应该用多个样本均数的T-test，方差分析也可。用的软件是SPSS或者SAS。孔板的重复利用:培养板要用好的（最好进口板），不好的板或重复利用的板只可做预实验。一般贴壁
总有同学分不清荧光与萤光的概念，导致犯了很低级的错误，例如有人问我，为什么我把pGL转染细胞，荧光显微镜下看不到荧光那？又比如 做双荧光素检测时能不能用酶标仪检测，或者该用什么仪器测那？这都是分不清荧光与萤光的区别导致的。本文只给刚入门的师弟师妹看，大神们不要笑话。 荧光，英文fluorescence，是指绿色荧光蛋白以及其变体（EGFP,CFP,ECFP,YFP,EYFP,DsRED等等）在收到激发后发射出的特定频率的光，这是一个生物物理反应，类似于我们高中物理学的什么基态啦，跃迁
等[82] 比较了传统苯酚–氯仿法、微柱吸 附法试剂盒和磁珠吸附法试剂盒对血浆游离结核分 枝杆菌DNA和质粒DNA的提取效率, 得出磁珠吸附 法对血浆游离DNA的提取效率最高, 尤其适合于小 片段DNA的提取。宋小燕等[83] 通过对国产试剂盒提 取血浆DNA的方法进行改良, 提取的血浆DNA的质 量不仅能达到相关分子 生物 学 实验的要求, 而且操 作简单、耗时短、成本低。Yin等[84] 将盐析与苯酚– 氯仿法相结合并进行改进提取血浆DNA, 得到的总 DNA是微柱吸附法 试剂
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