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999
- 英文名:
Phagocytosis Assay Kit (IgG FITC)
- CAS号:
/
- 保质期:
详见说明
- 供应商:
齐源生物
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
1 ea
齐源生物提供ELISA试剂盒代测,生化试剂盒代测,木质素代测,纤维素代测服务。
齐源生物长期现货出售各种进口代理品牌:美国Cayman,瑞典Agrisera,美国USP、美国R&D、QIAGEN凯杰、BioVision、sigma西格玛、加拿大TRC、加拿大TLC、美国CATO、美国O2si、GIBCO、日本wako、PeproTech、默克Merck、MBL、Invitrogen、OXOID、Hyclone、CST、Bio-Rad、Bender Medsystems、美国BD、Agrisera、ABNOVA、ABI、ABCAM、Thermo、赛默飞thermofisher、BP(英国药典)、德国Dr、Anogen、EXBIO、Demmeditec、Cell Biolabs、Prolmmune、ScyTek等。
关键词:吞噬作用检测试剂盒(IgG FITC)说明
试剂准备
1分析缓冲液制备将每个细胞分析缓冲片(ltem编号10009322)溶解在100 ml中蒸馏水。这个缓冲区应该稳定一年左右室温。
2台盼蓝猝灭液的制备
通过稀释台盼蓝原液制备台盼蓝猝灭溶液溶液(ltem No.400292)1:10于分析缓冲液中。搅拌均匀以确保溶液中没有颗粒或薄片
3乳胶珠兔IGG-FITC复合物随时可用。珠子的平均粒径为0.1微米。
4以低于80%的浓度对细胞进行培养治疗时合流并允许粘附
5将乳胶珠兔IGG-FITC复合物(ltem编号400291)直接添加到您的皮肤中预热培养基至1:100至1:500的最终稀释度
6在37摄氏度的温度下培养实验所需的时间。吞噬作用可在添加珠子后几分钟内开始,并持续一段时间
7对于荧光显微镜,可以直接观察到珠子的吸收在培养基中没有额外的洗涤步骤。但是,如果染色用活的/死的污渍或抗体表面标记是可取的,温和冲洗ith分析缓冲液将去除培养基和未结合的珠子。染色可以根据实验室的协议进行,然后进行可视化。
8对于流式细胞术,细胞必须从培养皿中取出通过温和的刮擦培养。将细胞转移到FACS管或96孔用于进一步染色或立即流式细胞术的v型底板
9区分吞噬珠子的细胞和单纯吞噬珠子的细胞在表面结合珠子,用台盼酶短时间(1-2分钟)孵育蓝色猝灭溶液,然后用分析缓冲液冲洗,将猝灭表面FITC荧光
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
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