- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-714850
- 中国
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Vibrio harveyi
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Vibrio harveyi
哈维氏弧菌（Vibrio Harveyi）革兰氏阴性菌，短杆状，两端钝圆，具一根 极生单鞭毛。易感染的物种有大菱鲆、青石斑鱼、斜带石斑鱼、鲈鱼、大黄 鱼、半滑舌鳎等。本产品是根据 PCR 原理开发的哈维氏弧菌检测试剂盒，它 具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩哈维氏弧菌，与其他病原没有交叉反
应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL（亮黄色） |
| 哈维氏弧菌PCR 引物混合液 | 13-14850yw | 100 μL（白盖） |
| 哈维氏弧菌PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 60908-14850pc | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | 13-14850sc | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 哈维氏弧菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而 得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上 待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 哈维氏弧菌PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（哈维氏弧菌PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 30sec |
| 55℃ | 30sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提 供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验），有的营共生生活（如根瘤菌），有的营寄生生活（如奈瑟氏球菌、黄单胞菌），另外还有专性细胞内寄生菌如立克次氏体目的细菌。依照取得化学能的代谢途径，可分为发酵性细菌和呼吸性细菌，前者营发酵代谢（如拟杆菌科和韦荣氏球菌科的细菌）；后者营呼吸代谢，其中有的以分子氧为最终电子受体（如假单胞菌），有的以氧化性的无机盐为最终电子受体（如硫酸盐或硝酸盐），而脱硫弧菌则以硫酸盐为最终电子受体行厌氧呼吸。 本纲细菌有球状（奈瑟氏球菌属）、杆状（假单胞菌属）和螺旋状（螺菌属）。大多数种类的细胞单独或成对
、Trc99A/JM109、副溶血性弧菌培养液10μl点于Wagatsuma氏琼脂培养基平皿上，37℃培养过夜。 重组质粒经过双酶消化，能切割出约600bp的片段，PCR能扩增出约600bp的片段。SDS-PAGE凝胶薄层扫描显示，在30℃、IPTG诱导的培养条件下，重组菌NWⅡ的tdh基因得到表达，表达产物的相对分子质量约为21×103，表达量占菌体总蛋白的13.4%。重组菌NWⅡ在Wagatsuma含血琼脂平皿上呈现典型的β-溶血环。 副溶血性弧菌的TDH由2条相同氨基酸链
氏染色阳性菌。百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等 属革兰氏阴性。所以根据细菌的革兰氏染色性质，可以缩小鉴定范围，有利于进一步分离鉴定，以对疾病做出诊断。又由于各种抗生素的抗菌谱不同，革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。实验方法革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是： 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行
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