转基因元件tg7染料法荧光定量PCR试剂盒

转基因元件tg7染料法荧光定量PCR试剂盒产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
样品cDNA合成:
①反应体系
序号  反应物  剂量 1  逆转录buffer  2μl
2  上游引物  0.2μl
3  下游引物  0.2μl
4 dNTP  0.1μl
5  逆转录酶MMLV  0.5μl
6  DEPC水  5μl
7  RNA模版  2μl
8  总体积  10μl
白细胞分化抗原抗体CD207抗体    XPC ELISA Kit    C组着色性干皮病偶联因子(XPC)ELISA试剂盒
白三烯B4受体2抗体    CLEC4K ELISA Kit    C-型凝集素域家族4成员K(CLEC4K)ELISA试剂盒
白细胞相关免疫球蛋白样受体2抗体    CLEC3B ELISA Kit    C-型凝集素域家族3成员B(CLEC3B)ELISA试剂盒
相似肿瘤抑制基因HUGL抗体    CLEC2C ELISA Kit    C-型凝集素域家族2成员C(CLEC2C)ELISA试剂盒
白介素1β抗体    CLEC11A ELISA Kit    C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)ELISA试剂盒
β-乳球蛋白抗体    CNP ELISA Kit    C-型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒
脂质磷酸磷酸酶相关蛋白1/可塑性相关基因3抗体    C-Peptide ELISA Kit    C-肽(C-Peptide)ELISA试剂盒
神经突触粘附样分子1抗体    CYTSB ELISA Kit    CytospinB蛋白(CYTSB)ELISA试剂盒
富含亮氨酸重复家庭蛋白1抗体    CYTSA ELISA Kit    CytospinA蛋白(CYTSA)ELISA试剂盒
富含亮氨酸重复家庭蛋白4抗体    CYS1 ELISA Kit    Cystin1蛋白(CYS1)ELISA试剂盒
瘦素受体抗体    CYLD ELISA Kit    Cylindromatosis蛋白(CYLD)ELISA试剂盒
白血病抑制因子抗体    CYLC2 ELISA Kit    Cylicin2蛋白(CYLC2)ELISA试剂盒
Nogo受体反应蛋白抗体    CYLC1 ELISA Kit    Cylicin1蛋白(CYLC1)ELISA试剂盒
凋亡抑制蛋白抗体    CPD ELISA Kit    Cupidin蛋白(CPD)ELISA试剂盒
层粘连蛋白抗体    CUL9 ELISA Kit    Cullin9蛋白(CUL9)ELISA试剂盒
Lpin1 抗体    CUL7 ELISA Kit    Cullin7蛋白(CUL7)ELISA试剂盒
Lpin1 抗体    CUL5 ELISA Kit    Cullin5蛋白(CUL5)ELISA试剂盒
溶菌酶抗体    CUL4B ELISA Kit    Cullin4B蛋白(CUL4B)ELISA试剂盒
蚓激酶抗体    CUL4A ELISA Kit    Cullin4A蛋白(CUL4A)ELISA试剂盒
瘦素抗体    CUL3 ELISA Kit    Cullin3蛋白(CUL3)ELISA试剂盒
瘦素受体抗体    CUL2 ELISA Kit    Cullin2蛋白(CUL2)ELISA试剂盒
瘦素受体抗体    CUL1 ELISA Kit    Cullin1蛋白(CUL1)ELISA试剂盒
晚期包膜蛋白1抗体    CUZD1 ELISA Kit    CUB带状疮疹透明区样域蛋白1(CUZD1)ELISA试剂盒
富含亮氨酸样酸性核蛋白抗体    CTDP1 ELISA Kit    CTD磷酸酶1(CTDP1)ELISA试剂盒
晚期包膜蛋白2B抗体    CRTC3 ELISA Kit    CREB调节转录辅激活因子3(CRTC3)ELISA试剂盒
转基因元件tg7染料法荧光定量PCR试剂盒脂肪酶家庭成员K抗体    CREBBP ELISA Kit    CREB结合蛋白(CREBBP)ELISA试剂盒
白血病相关蛋白18/癌蛋白18抗体    CREBZF ELISA Kit    CREB/ATFBZIP转录因子(CREBZF)ELISA试剂盒
无脑回的致病基因LIS1抗体    CRAF ELISA Kit    C-Raf原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶(CRAF)ELISA试剂盒
溶酶体相关膜蛋白3抗体    CRNN ELISA Kit    Cornulin蛋白(CRNN)ELISA试剂盒
亮氨酸脑啡肽抗体    CRN ELISA Kit    Corin蛋白(CRN)ELISA试剂盒
自噬微管相关蛋白轻链3抗体    CPNE9 ELISA Kit    CopineⅨ蛋白(CPNE9)ELISA试剂盒
指甲髌骨综合征相关蛋白NPS1抗体    CPNE8 ELISA Kit    CopineⅧ蛋白(CPNE8)ELISA试剂盒
自噬微管相关蛋白轻链β3抗体    CPNE7 ELISA Kit    CopineⅦ蛋白(CPNE7)ELISA试剂盒
LRRC59蛋白抗体    CPNE5 ELISA Kit    CopineⅤ蛋白(CPNE5)ELISA试剂盒
LRRC41蛋白抗体    CPNE4 ELISA Kit    CopineⅣ蛋白(CPNE4)ELISA试剂盒
促黄体生成素受体抗体    CPNE3 ELISA Kit    CopineⅢ蛋白(CPNE3)ELISA试剂盒
乳清蛋白α抗体    CPNE2 ELISA Kit    CopineⅡ蛋白(CPNE2)ELISA试剂盒
核纤层蛋白B2抗体    CPNE1 ELISA Kit    CopineⅠ蛋白(CPNE1)ELISA试剂盒
层粘蛋白α5抗体    CNST ELISA Kit    Consortin蛋白(CNST)ELISA试剂盒
L-瓜氨酸抗体    CB ELISA Kit    Collybistin蛋白(CB)ELISA试剂盒
泌乳升高蛋白1抗体    CDAN1 ELISA Kit    Codanin1蛋白(CDAN1)ELISA试剂盒
溶酶体相关膜蛋白4α抗体    COCH ELISA Kit    Cochlin蛋白(COCH)ELISA试剂盒
分化相关基因14抗体    MERTK ELISA Kit    C-Mer原癌基因酪氨酸激酶(MERTK)ELISA试剂盒
β内酰胺酶样蛋白2抗体    CLOCK ELISA Kit    Clock同源物(CLOCK)ELISA试剂盒
神经突触粘附样分子4抗体    CLVS2 ELISA Kit    Clavesin2蛋白(CLVS2)ELISA试剂盒
可溶性半乳糖凝集素3结合蛋白抗体    CLVS1 ELISA Kit    Clavesin1蛋白(CLVS1)ELISA试剂盒
瘦素抗体    CLSPN ELISA Kit    Claspin蛋白(CLSPN)ELISA试剂盒
磷脂酸磷酸酯酶LPIN1抗体    CLRN3 ELISA Kit    Clarin3蛋白(CLRN3)ELISA试剂盒
G蛋白偶联受体6抗体    CLRN2 ELISA Kit    Clarin2蛋白(CLRN2)ELISA试剂盒
λ轻链抗体    CLRN1 ELISA Kit    Clarin1蛋白(CLRN1)ELISA试剂盒
溶酶体相关膜蛋白2抗体    CIT ELISA Kit    Citron蛋白(CIT)ELISA试剂盒
肺腺瘤易感蛋白2抗体    PRKG1 ELISA Kit    cGMP依赖性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)ELISA试剂盒
磷酸化RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体    CRBN ELISA Kit    Cereblon蛋白(CRBN)ELISA试剂盒
肿瘤抑制基因LATS2抗体    CER ELISA Kit    Cerberus蛋白(CER)ELISA试剂盒
轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟，取出后立即冰水浴至管内外温度一致，然后加逆转录酶0.5μl，37℃水浴60分钟。
③取出后立即95℃干浴3分钟，得到逆转录终溶液即为cDNA溶液，保存于-80℃待用。

实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。