马铃薯内标准UDP-葡萄糖焦磷酸酶基因探针法PCR试剂盒

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  • 上海一研
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  • EY-P963880
  • 2025年07月16日
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    • 供应商

      上海一研

    • 规格

      50T

    马铃薯内标准UDP-葡萄糖焦磷酸酶基因探针法PCR试剂盒产品特点:
    灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
    特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
    稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
    扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
    样品RNA的抽提:
    ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
    ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
    ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
    Binding Protein 1 (RALBP1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (ARPC4)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
    神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
    尿皮质素2(UCN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Urocortin 2 (UCN2)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
    解整合素金属蛋白酶28(ADAM28)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 28 (ADAM28)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    尿皮质素3(UCN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
    半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Cystatin B (CSTB)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Semaphorin 7A (SEMA7A)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    肌肽酶1(CNDP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Carnosine Dipeptidase 1 (CNDP1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    泛素结合酶E2C(UBE2C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C (UBE2C)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    Klotho蛋白(KL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Klotho (KL)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
    VEGF共调节趋化因子1(VCC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
    细胞因子受体样因子1(CRLF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Cytokine Receptor Like Factor 1 (CRLF1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    生长分化因子5(GDF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    羧肽酶E(CPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Carboxypeptidase E (CPE)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    马铃薯内标准UDP-葡萄糖焦磷酸酶基因探针法PCR试剂盒白介素23受体(IL23R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Interleukin 23 Receptor (IL23R)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
    TATA框结合蛋白关联因子12(TAF12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 12 (TAF2 RNA质量检测
    1)紫外吸收法测定
    先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
    ① 浓度测定
    A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
    样品cDNA合成:
    ①反应体系
    序号  反应物  剂量 1  逆转录buffer  2μl
    2  上游引物  0.2μl
    3  下游引物  0.2μl
    4 dNTP  0.1μl
    5  逆转录酶MMLV  0.5μl
    6  DEPC水  5μl
    7  RNA模版  2μl
    8  总体积  10μl
    轻弹管底将溶液混合,6000rpm短暂离心。
    ②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟,取出后立即冰水浴至管内外温度一致,然后加逆转录酶0.5μl,37℃水浴60分钟。
    ③取出后立即95℃干浴3分钟,得到逆转录终溶液即为cDNA溶液,保存于-80℃待用。
    马铃薯内标准UDP-葡萄糖焦磷酸酶基因探针法PCR试剂盒
    实验步骤:
    ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
    ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
    ③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
    ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
    ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

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