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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海一研
- 规格:
50T
马铃薯内标准UDP-葡萄糖焦磷酸酶基因探针法PCR试剂盒产品特点:
灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
样品RNA的抽提:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
Binding Protein 1 (RALBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (ARPC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
尿皮质素2(UCN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Urocortin 2 (UCN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
解整合素金属蛋白酶28(ADAM28)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 28 (ADAM28) 48T/96T Homo sapiens (Human)
尿皮质素3(UCN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cystatin B (CSTB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 7A (SEMA7A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
肌肽酶1(CNDP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnosine Dipeptidase 1 (CNDP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
泛素结合酶E2C(UBE2C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C (UBE2C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
Klotho蛋白(KL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Klotho (KL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
VEGF共调节趋化因子1(VCC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
细胞因子受体样因子1(CRLF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytokine Receptor Like Factor 1 (CRLF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
生长分化因子5(GDF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
羧肽酶E(CPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxypeptidase E (CPE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
马铃薯内标准UDP-葡萄糖焦磷酸酶基因探针法PCR试剂盒白介素23受体(IL23R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 23 Receptor (IL23R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
TATA框结合蛋白关联因子12(TAF12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 12 (TAF2 RNA质量检测
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
样品cDNA合成:
①反应体系
序号 反应物 剂量 1 逆转录buffer 2μl
2 上游引物 0.2μl
3 下游引物 0.2μl
4 dNTP 0.1μl
5 逆转录酶MMLV 0.5μl
6 DEPC水 5μl
7 RNA模版 2μl
8 总体积 10μl
轻弹管底将溶液混合,6000rpm短暂离心。
②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟,取出后立即冰水浴至管内外温度一致,然后加逆转录酶0.5μl,37℃水浴60分钟。
③取出后立即95℃干浴3分钟,得到逆转录终溶液即为cDNA溶液,保存于-80℃待用。
实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
样品RNA的抽提:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
Binding Protein 1 (RALBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Actin Related Protein 2/3 Complex Subunit 4 (ARPC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
神经元正五聚蛋白Ⅰ(NPTX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin I (NPTX1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
尿皮质素2(UCN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Urocortin 2 (UCN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
解整合素金属蛋白酶28(ADAM28)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 28 (ADAM28) 48T/96T Homo sapiens (Human)
尿皮质素3(UCN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cystatin B (CSTB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Semaphorin 7A (SEMA7A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
肌肽酶1(CNDP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnosine Dipeptidase 1 (CNDP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
泛素结合酶E2C(UBE2C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C (UBE2C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
Klotho蛋白(KL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Klotho (KL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
VEGF共调节趋化因子1(VCC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
细胞因子受体样因子1(CRLF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cytokine Receptor Like Factor 1 (CRLF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
生长分化因子5(GDF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
羧肽酶E(CPE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxypeptidase E (CPE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
马铃薯内标准UDP-葡萄糖焦磷酸酶基因探针法PCR试剂盒白介素23受体(IL23R)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 23 Receptor (IL23R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
TATA框结合蛋白关联因子12(TAF12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 12 (TAF2 RNA质量检测
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
样品cDNA合成:
①反应体系
序号 反应物 剂量 1 逆转录buffer 2μl
2 上游引物 0.2μl
3 下游引物 0.2μl
4 dNTP 0.1μl
5 逆转录酶MMLV 0.5μl
6 DEPC水 5μl
7 RNA模版 2μl
8 总体积 10μl
轻弹管底将溶液混合,6000rpm短暂离心。
②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟,取出后立即冰水浴至管内外温度一致,然后加逆转录酶0.5μl,37℃水浴60分钟。
③取出后立即95℃干浴3分钟,得到逆转录终溶液即为cDNA溶液,保存于-80℃待用。
实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
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