QC3 (FITC/PE/PE-Cy™5, APC)

优化流式配色的小技巧

nm激光激发（图 1）。当同时用 PerCP-Cy5.5 和 APC 对细胞进行染色时，PerCP-Cy5.5 在 635 nm 激发范围产生的信号就会对 APC 的信号产生干扰，尤其是当 APC 染色的抗原表达水平较低的时候，从而影响实验结果。而用美天旎的 PE-Vio®615 染料去替换PerCP-Cy5.5 可以很好地解决这个问题，因 PE-Vio®615 不会被 635 nm 激光激发（图 1）。 图 1：PerCP-Cy™5.5 会被 635 nm 激光激发， 而PE-Vio®615

如何选择合适的流式抗体

抗体二抗上连接有荧光染料。直接标记染色背景低，实验程序少尽量减少实验工序和过程，以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内，建议尽量用直接标记的抗体进行实验。 3、流式抗体荧光标记的选择： 如果实验中检测单一指标：不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。以某仪器为例：PE ＞APC ＞PE-Cy5 ＞PerCP ＞FITC ＞PerCP-Cy5.5，通常来说，PE最强，适用于弱表达抗原。FITC强度较弱，适用于强表达抗原，使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。 如果同时检测多个

对外周血中人自然杀伤（NK）细胞群的表型表征分析

、CD14-PE、CD19-PE、CD3-PE、CD66b-PE、CD56-PE-Cy7、CD11c-APC、 CD45-AF700、CD38-APC-AF750（每次测试 5μL），以及 CD16-FITC（每次测试 20 μL），并在冰上孵育 30 分钟。10. 在 4℃ 条件下，300 x G 离心细胞 5 分钟。11. 吸取上清液。12. 重悬到 500 μL 染色缓冲液中。13. 通过 CytoFLEX 获取结果。通过 CytoFLEX 进行数据采集：1. 创建新补偿值。2. 如适用