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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Porcine Torque Teno Virus(PTTV)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Porcine Torque Teno Virus(PTTV)
猪细环病毒又叫托克特诺病毒,它是一种可能与肝炎相关的输血病毒,广 泛存在于健康人体和动物体内,宿主有人类、猪、牛等,该病毒可以与其他病 毒协同感染,病毒的存在给养猪业带来了潜在的经济影响,目前对于该病毒的 致病性和机理正在研究中,因此快速检测猪细环病毒具有重要意义。本产品是 根据 PCR 原理开发检测猪细环病毒的试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猪细环病毒,与其他病毒没有交叉 反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL(亮黄色) |
| 猪细环病毒PCR 引物混合液 | 同13-42200yw | 100 μL(白盖) |
| 猪细环病毒PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 同13-42200pc | 50 μL(黄盖) |
| 使用手册 | 同13-42200sc | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和 一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是猪细环病毒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模 板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 猪细环病毒PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照(猪细环病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 15 sec |
| 58℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 10 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期PCR 产物阳性对照必须有107bp条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验 无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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