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猪胸膜肺炎放线杆菌PCR试剂盒

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  • YBio/钰博生物已认证
  • 中国
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      Actinobacillus pleuropneumoniae

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海钰博生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃保存

    • 规格

      50次

    猪胸膜肺炎放线杆菌PCR试剂盒
    Actinobacillus pleuropneumoniae
    产品简介:
    本试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测,可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因,进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域,不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较,本方法更为快速,特异性更高。
    它具有下列特点:
    1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
    2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增猪胸膜肺炎放线杆菌菌序列,与其他没有交叉反应。
    3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
    4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
    5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
    产品细节图片1
    规格及成分:
    编号 十孔盒包装
    PCR MagicMix 3.0 试剂一 1 mL(红盖)
    超纯水 试剂二 1 mL(亮黄色)
    猪胸膜肺炎放线杆菌PCR 引物混合液 试剂三 100 μL(白盖)
    猪胸膜肺炎放线杆菌PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) 试剂四 50 μL(黄盖)
    使用手册 ZY-99047 1份

    运输及保存
    低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
    自备试剂:
    样本DNA
    使用方法:
    一、样品 DNA 的制备
    1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
    2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是猪胸膜肺炎放线杆菌PCR 阳性对照的1000 倍稀释液,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
    二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
    3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

    成分
    样品管
    N+2 个
    PCR
    阴性对照
    PCR
    性对照
    PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
    猪胸膜肺炎放线杆菌PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
    N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - -
    PCR 阴性对照(水) - 18 μL -
    PCR 阳性对照(猪胸膜肺炎放线杆菌
    PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液)

    -

    -

    18 μL

    4. 按下表设置 PCR 反应:
    过程 温度 时间
    预变性 95℃ 5 min

    PCR 反应
    (35 个循环)
    95℃ 15 sec
    57℃ 15 sec
    72℃ 40 sec
    最后延伸 72℃ 10 min
    产品细节图片2
    三、电泳检测
    5. 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。  对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

     

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