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- 文献和实验
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‘-20℃保存
- 保质期:
有效期一年
- 库存:
30
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
50次
| 编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
| 试剂二 | 成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
| 试剂三 | 成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
| 试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
| 试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
| 试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
| 试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
| 试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。
通常一条引物中简并的碱基不要超过4处,如果简并的碱基数过多,则会造成反应体系中有效引物的量相对减少,此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大,容易引起非特异扩增,应加以注意。
适合的模板添加量是多少?
根据基因组DNA、质粒DNA及反转录产物等模板种类不同,PCR反应的适合模板添加量也不同。 特别是使用PrimeSTAR® HS DNA Polymerase时,过剩的模板量有时会对PCR扩增产生阻害作用。 另外,使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,根据模板种类、模板使用量及模板质量可调整PCR反应条件。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,模板可按以下推荐量添加(50 μl反应体系):
· Human genomic DNA:5~200 ng
· E.coli genomic DNA: 100 pg~100 ng
· cDNA Library:1~200 ng
· λDNA:10 pg~10 ng
· 质粒DNA:10 pg~1 ng
PCR产物 (3‘端附有A碱基时) 经末端平滑后,克隆于去磷酸的平滑末端载体时,其PCR产物需不需要5′末端磷酸化?
需要。一般的PCR用引物5′末端都不带磷 (除非在引物合成时已特别标记)。使用这种引物进行PCR的PCR产物经末端平滑化后,与去磷酸的平滑末端载体连接之前,PCR产物必须进行5′末端磷酸化。
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文献和实验专性细胞内寄生、行二分裂繁殖的原核微生物类群。英国医生立克次氏(H.T.Ricketts)研究斑疹伤寒时发现,并于1919年命名。大小介于细菌与病毒之间,除Q热立克次氏体外,均不能通过细菌滤器。细胞球状、杆状或多形态。球状体直径0.2~0.5微米,杆状体大小0.3~0.6×0.8~20微米,有些种在细胞分裂前可长达4微米。形态特征对种的鉴定有重要意义。革兰氏染色阴性。在光学显微镜下可见,存在于宿主的胞质或细胞核中。细胞结构与细菌相似,细胞壁中含有胞壁酸,二氨基庚二酸等与细菌
,如引起斑疹伤寒、斑点热、恙虫病等;它与一些昆虫关系密切,如森林蜱、体虱,都可以是立克次体的宿主或储存宿主,通过它们作为传播媒介而感染人。3、名称由来立克次氏体是1909年美国病理学副教授立克次(Howard Taylor Ricketts, 1871–1910), 在研究落基山斑疹热时首先发现的。第二年,他不幸因感染斑疹伤寒而为科学献身。1916年罗恰•利马首先从斑疹伤寒病人的体虱中找到,并建议取名为普氏立克次氏体,以纪念从事斑疹伤寒研究而牺牲的立克次和捷克科学家普若瓦帅克。1934年,我国
。 莫氏立克次体的传播方式普氏立克次体有所不同。莫氏立克次体长期寄生于隐性感染鼠体,鼠蚤吸鼠血后,立克次体进入其消化道并在肠上皮细胞内繁殖。细胞破裂后将立克次体释出,混入蚤粪中,在鼠和小家鼠群间传播。鼠蚤只在鼠死亡后才离开鼠转向叮吮人血,而使人受感染。如此时人体寄生有人虱,可通过人虱继发地在人群中传播。此外,带有立克次体的干燥蚤粪还可经口、鼻及眼结膜进入人体而致病。 莫氏立克次体感染后与普氏立克次体有交叉免疫。 (三)诊断与防治 微生物学检查原则与普氏立克次体基本
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