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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
‘-20℃保存
- 保质期:
有效期一年
- 库存:
30
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
50次
| 编号 | 成分 | 十孔盒包装(去纸托) |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黄盖) |
| 试剂二 | 成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白盖) |
| 试剂三 | 成分 PCR 阳性对照 | 50 uL(黄盖) |
| 试剂四 | 超纯水 | 1 mL(本色盖) |
| 试剂五 | DNA 释放剂试用装 | 50 次(成分见下) |
| 试剂六 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 | 50 uL(白盖) |
| 试剂七 | 免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 | 100uL(绿盖) |
| 试剂八 | 免 DNA 提取试剂溶液 B | 400 uL(红盖) |
| 试剂九 | 使用手册 | 1 份 |
简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。
通常一条引物中简并的碱基不要超过4处,如果简并的碱基数过多,则会造成反应体系中有效引物的量相对减少,此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大,容易引起非特异扩增,应加以注意。
适合的模板添加量是多少?
根据基因组DNA、质粒DNA及反转录产物等模板种类不同,PCR反应的适合模板添加量也不同。 特别是使用PrimeSTAR® HS DNA Polymerase时,过剩的模板量有时会对PCR扩增产生阻害作用。 另外,使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,根据模板种类、模板使用量及模板质量可调整PCR反应条件。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,模板可按以下推荐量添加(50 μl反应体系):
· Human genomic DNA:5~200 ng
· E.coli genomic DNA: 100 pg~100 ng
· cDNA Library:1~200 ng
· λDNA:10 pg~10 ng
· 质粒DNA:10 pg~1 ng
PCR产物 (3‘端附有A碱基时) 经末端平滑后,克隆于去磷酸的平滑末端载体时,其PCR产物需不需要5′末端磷酸化?
需要。一般的PCR用引物5′末端都不带磷 (除非在引物合成时已特别标记)。使用这种引物进行PCR的PCR产物经末端平滑化后,与去磷酸的平滑末端载体连接之前,PCR产物必须进行5′末端磷酸化。
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文献和实验的常用消毒药较敏感。如3%的烧碱溶液、5%甲醛溶液、10%的漂白粉混悬液等,均能较快地杀灭病毒。其他如阳光直射、干燥、高温等都不利于病毒的繁殖生存。 (二)侵害的禽类 鸭瘟对不同日龄、不同品种的鸭均可感染,但以番鸭、麻鸭和绵鸭最易感,北京鸭次之。在自然感染条件下,成年鸭发病率和死亡率较高,30日龄以内的雏鸭却较少发病,但在人工感染时,雏鸭却较成年鸭容易发病,且死亡率也高。在其他禽类中,鹅、野生水禽、大雁等通过人工接种均易感。 (三)传染原 鸭瘟的主要传染原是病鸭和带毒鸭,其分泌物和排泄
毒并以其作为辅助病毒时才能复制。人的AAV有4型,人血清中普遍存在抗体,但与疾病的关系未定。此外,尚有禽、牛和狗的AAV。 小鹅瘟病毒是小DNA病毒科的成员之一。1956年在中国扬州首先分离到此病毒,以后证明是中国各地雏鹅的一种致死性传染病的病原,对5~25日龄的雏鹅具有极高的传染性。本病毒无血凝性,除雏鹅和番鸭雏外,不能使其他动物致病。可用未经免疫的母鹅所产卵孵化的鹅胚(12~14日龄)分离培养,并可在鹅胚细胞中增殖而引起细胞病变。用减毒活疫苗免疫母鹅可预防雏鹅发病。
、寄生虫、细胞、生物毒素、激素等各种致病原,通过接种而使正常动物发生疾病。如接种细菌、病毒于敏感动物使其产生各种传染病。目前已知的150余种人畜共患病提供了极有意义的传染病材料。从流行病学、病理学或并发症等不同角度研究,首先要充分了解动物与人在疾病易感性和临床表现等方面的同异处。例如轮状病毒可引起婴儿急性坏死性肠类,犬感染轮状病毒后的表现只是亚临床的。然而严重威胁幼犬的肠道病毒是细小病毒,而人对细小病毒则并不易感。 物理因素是多方面的。例如在机械力作用下产生各种外伤性脑损伤、骨折等模型
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