- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-786212
- 中国
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Chicken Embro Lethal Orphan Virus(CELOV)
本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）技术检测，可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因，进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域，不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较，本方法更为快速，特异性更高。
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增鸡胚致死孤儿病毒序列，与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 鸡胚致死孤儿病毒PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 鸡胚致死孤儿病毒PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是鸡胚致死孤儿病毒PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 鸡胚致死孤儿病毒PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（鸡胚致死孤儿病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验。 本科病毒分两个属：①哺乳动物腺病毒属：它们有共同的群特异性抗原，包括人腺病毒34个血清型和猿猴、牛、羊、猪、狗、鼠等哺乳类动物的腺病毒，其中狗的腺病毒具有明显的病原性，引起狗的传染性肝炎和喉气管炎；②禽腺病毒属：代表株是鸡胚致死孤儿病毒，它有14个血清型，具有共同的群特异性抗原。1976年，在荷兰从鸡中发现1种能凝集多种禽红细胞的腺病毒，定名为减蛋综合征病毒。 人腺病毒经呼吸道和粪口途径传播，按其血凝性分为4 个亚群：亚群Ⅰ中，特别是3、7型可引起急性呼吸道感染．3型引起
EID 50为 egg infectious dose 的缩写。把一系列等比稀释后的病毒稀释液接种到高易感性的鸡胚中，计算病毒增殖后而呈阳性反应的卵数，就可得知使 50 ％的鸡胚成为阳性的这一病毒稀释倍数，该法就称为 Re － ed － Muench 法。并可看到在 LD50 （ 50 ％阳性）附近的稀释倍数与死亡率（阳性反应数）成大致的比例关系，用 50 ％致死量的病毒稀释液的方法［含有病毒的溶液以等比级数进行稀释后，并把各稀释液分别接种于一定数量的个体动物（或鸡卵）中，求其死亡
新城疫病毒 Newcastle disease virus 属于副粘病毒属，最早由多伊尔（ T． M． Doyle）于 1927年所记载。缩写 NDV。在直径为 150— 200毫微米的质粒中含有分子量是 7.8× 106 的 RNA。质粒内具有 RNA聚合酶，而在包膜上存在有神经氨（糖）酸苷酶。它是鸡新城疫的病原体，引起支气管炎、肺炎、腹泻、痉挛和麻痹等，死亡率很高。对其他禽类也能引起致死性病变，也可引起人的结膜炎。能在鸡胚绒毛尿囊膜和鸡胚中，以及牛肾、人胎、海拉细胞（ Hela
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