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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Hepatitis B Virus(HBV)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Hepatitis B Virus(HBV)
本试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测,可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因,进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域,不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较,本方法更为快速,特异性更高。
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增乙型肝炎病毒B型序列,与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL(亮黄色) |
| 乙型肝炎病毒B型PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL(白盖) |
| 乙型肝炎病毒B型PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 试剂四 | 50 μL(黄盖) |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是乙型肝炎病毒B型PCR 阳性对照的1000 倍稀释液,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 乙型肝炎病毒B型PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照(乙型肝炎病毒B型PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。 对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验扩增.可用于同时检测多种病原体或鉴定出是那一型病原体感染,可组合系统的有: ①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者体内,有时存在多种肝炎病毒重叠感染,有时是甲乙丙型肝炎病毒重叠;有时可能是甲乙型肝炎病毒重叠;有时是乙丙型肝炎病毒重叠. ②肠道致病性细菌的检测,如伤寒,痢疾和霍乱,有时具有较相同的肠道症状,有时痢疾霍乱同存一病人并同时发病. ③性病的检测,如梅毒,淋病及艾滋病的诊断. ④战伤细菌及生物战剂细菌的检测
(二)细菌类疫苗 卡介苗、伤寒疫苗、霍乱疫苗、布氏菌疫苗、炭疽疫苗、痢疾疫苗、百日咳疫苗、鼠疫疫苗、肺炎链球菌疫苗、沙门菌多糖疫苗、B型流感嗜血杆菌疫苗、破伤风疫苗、白喉疫苗。 (三)联合疫苗 百白破联合疫苗,三价脊髓灰质炎灭活疫苗,麻疹、流行性腮腺炎、风疹联合疫苗,麻疹、风疹联合疫苗,乙型肝炎、B型流感嗜血杆菌联合疫苗,百白破、B型流感嗜血杆菌联合疫苗,百白破、乙型肝炎联合疫苗,甲、乙型肝炎联合疫苗,伤寒、副伤寒二联疫苗
人员还要对我进行7项的检验,包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、梅毒螺旋体、艾滋病病毒、转氨酶、血型正反定型等。只有这些检验结果全部合格,工作人员才会给我打印出冠有不同的名字的成品标签,如A型悬浮红细胞、B型新鲜冰冻血浆、AB型血小板、O型冷沉淀等。再经过供血科工作人员人工核对后,贴上成品标签的我们按血型分别住进贴有名字、温度不同的宽敞舒适的冰箱或其他储存设备中,供医院临床使用。 来到云南昆明血液中心,我才知道,这里担负着为昆明210多家医疗单位提供医疗、急救、科研用血,国家战备储备用血和全省输血
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