- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-745000
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Ranavirus
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Ranavirus
本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）技术检测，可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因，进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域，不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较，本方法更为快速，特异性更高。
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增蛙病毒序列，与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 蛙病毒PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 蛙病毒PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是蛙病毒PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 蛙病毒PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（蛙病毒PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验组织中观察到多核细胞。 20世纪70年代，科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象，但是当时科学发展水平的限制，没有给1962年，日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。 1965年，英国科学家进一步证实了灭活的病毒在适当的条件下也可以诱发动物细胞融合。 后来科学家又成功诱导了不同种动物的体细胞融合，并且能将杂种细胞培养 成活。细胞融合技术不断改进，现在已广泛应用于细胞学，遗传学，免疫 学 ，病毒学等多种学科的研究工作中。 过程
亦称勒克肿瘤病毒。属疱疹病毒属，质粒直径为 160— 240毫微米，具有和 EB病毒相同的一部分抗原。从栖息于北美及其他地方的一种蛙（ Rana pipiens）上，特别是从自然发生肿瘤的个体中于早春（水温 2— 7℃）易于分离到此病毒。尚未确定它对蛙类有致肿瘤性。在来自 Rana pipiens蛙的 ICR-RPD67.7和蛙胚的 RPE67.7等细胞株中能大量地增殖，并显有细胞变性效果。培养最适温度为 25℃。
瘤；（ 3）人淋巴细胞的细胞株具有全部 E． B病毒的基因等，并相继报道伯基特氏淋巴瘤的病原体就是此病毒基因。作为相类似的动物肿瘤性疾病有：蛙的肾脏肿瘤与蛙疱疹病毒；鸡的马立克氏病与马立克氏病毒；由松鼠猴（ squirrelmonkey）体内分离到的猴疱疹病毒（ herpes saimi-ri virus）与引起夜猴（ owl monkey）和狨（ mar-moset）的恶性淋巴瘤等。其他方面还怀疑 E． B病毒与鼻咽癌（ nasopharyngeal carcinoma）有关。另还了解到与本病毒有相同抗原
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