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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 英文名:
Ranavirus
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50次
Ranavirus
蛙病毒(African swine fever, ASF)是由蛙病毒(African swine fever virus, ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病,病 死率高达100%,是我国一类动物疫病和世界动物卫生组织规定的必须报告的动物疫病,受到世界各国的高度重视。因此 ASFV 的快速准确鉴定,对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了ASFV的PCR 检测试剂盒,它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增蛙病毒,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。
规格及成分
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×PCR MagicMix | 1 mL(红盖) |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL(亮黄色) |
| 试剂三 | 蛙病毒 PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 蛙病毒 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(黄盖) |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
自备试剂 样品 DNA。
使用方法 一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 蛙病毒 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
| 成份 | N+2 个 样品管 |
PCR 阴性 对照 |
PCR 阳性 对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 蛙病毒 PCR 引物混合液 |
各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品 DNA模板 |
各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照(水) | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照(蛙病毒PCR阳性对照1000倍稀释液) | -- | -- | 18μL |
- 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验组织中观察到多核细胞。 20世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是当时科学发展水平的限制,没有给1962年,日本科学家发现日本血凝型病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合的现象。 1965年,英国科学家进一步证实了灭活的病毒在适当的条件下也可以诱发动物细胞融合。 后来科学家又成功诱导了不同种动物的体细胞融合,并且能将杂种细胞培养 成活。细胞融合技术不断改进,现在已广泛应用于细胞学,遗传学,免疫 学 ,病毒学等多种学科的研究工作中。 过程
亦称勒克肿瘤病毒。属疱疹病毒属,质粒直径为 160— 240毫微米,具有和 EB病毒相同的一部分抗原。从栖息于北美及其他地方的一种蛙( Rana pipiens)上,特别是从自然发生肿瘤的个体中于早春(水温 2— 7℃)易于分离到此病毒。尚未确定它对蛙类有致肿瘤性。在来自 Rana pipiens蛙的 ICR-RPD67.7和蛙胚的 RPE67.7等细胞株中能大量地增殖,并显有细胞变性效果。培养最适温度为 25℃。
瘤;( 3)人淋巴细胞的细胞株具有全部 E. B病毒的基因等,并相继报道伯基特氏淋巴瘤的病原体就是此病毒基因。作为相类似的动物肿瘤性疾病有:蛙的肾脏肿瘤与蛙疱疹病毒;鸡的马立克氏病与马立克氏病毒;由松鼠猴( squirrelmonkey)体内分离到的猴疱疹病毒( herpes saimi-ri virus)与引起夜猴( owl monkey)和狨( mar-moset)的恶性淋巴瘤等。其他方面还怀疑 E. B病毒与鼻咽癌( nasopharyngeal carcinoma)有关。另还了解到与本病毒有相同抗原
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