- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-729200
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Amycolaptosis spp.
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Amycolaptosis spp.
本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）技术检测，可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因，进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域，不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较，本方法更为快速，特异性更高。
它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增拟无枝菌酸菌通用序列，与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 拟无枝菌酸菌通用PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 拟无枝菌酸菌通用PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是拟无枝菌酸菌通用PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 拟无枝菌酸菌通用PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（拟无枝菌酸菌通用PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验诺卡氏菌属于革兰氏阳性。有时抗酸的菌丝体内含诺卡氏菌类脂（LCN～A）和诺卡枝菌酸，细胞壁Ⅳ型。根据菌丝体发育的程度和断裂的迟早，将本属分为3群。 本属菌广泛分布于自然界医学教育|网搜集整理。有的致病，引起人和动物的诺卡氏菌病。它们也是多种抗生素的产生菌。此外，在石油脱蜡、污水净化方面也起一定作用。代表种为鼻疽诺卡氏菌。 诺卡氏菌
基生成红色化合物，称V-P（+）反应。 试验方法： 1）O'Meara氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养48h,培养液1ml加O'Meara试剂（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氢氧化钠水溶液）1ml,摇动试管1~2min,静置于室温或36±1°C恒温箱，若4h内不呈现伊红、即判定为阴性。亦有主张在48~50°C水浴放置2h后判定结果者。 2）Barritt氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养4天、培养液2.5ml先加入5°Cα
细菌中的 1群。本群细菌革兰氏染色阳性，无芽孢；形态不规则，有棒状、杆状、类球形，有时有原始分枝，但不形成菌丝体。在分类上，棒状菌群与放线菌比较接近，两者胞壁组分相似，而棒状杆菌与放线菌的分枝杆菌属、诺卡氏菌属的菌体均含有结构相似的枝菌酸。根据《伯杰氏细菌学鉴定手册》（第 8版），棒状菌群包括棒杆菌属、节杆菌属、纤维单胞菌属、短杆菌属、库特氏菌属和微杆菌属 6属。 棒杆菌属 分为人和动物的寄生菌和致病菌、植物致病菌以及腐生菌 3部分，即①人和动物的寄生菌和致病
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