- ￥1300 - 1900
- ycextract
- 详见说明书
- 国产/进口
- YPH103657
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
＞90
- 供应商：
云萃生物
- 检测范围：
详见说明书
- 检测方法：
双抗体夹心法
- 应用：
仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
- 适应物种：
human
- 标记物：
参考说明书
- 样本：
血清、血浆、细胞上清、组织匀浆等液体样本
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1300.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥1900.0 |
仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人组织因子的含量。
| 产品名称 |
人188kDa核孔蛋白(NUP188)ELISA试剂盒 |
| 英文名称 |
Human Nucleoporin 188kDa(NUP188)ELISA Kit |
| 货号 |
YPH103657 |
人188kDa核孔蛋白(NUP188)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中丝虫抗体IGg水平。用纯化的丝虫抗体IGg抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入（NO），再与 HRP 标记的（NO）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的（NO）呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中丝虫抗体IGg浓度。
试剂盒组成:
| 1 |
20 倍浓缩洗涤液 |
30ml×1 瓶 |
7 |
终止液 |
6ml×1 瓶 |
| 2 |
酶标试剂 |
6ml×1 瓶 |
8 |
标准品（270ng/L） |
0.5ml×1 瓶 |
| 3 |
酶标包被板 |
12 孔×8 条 |
9 |
标准品稀释液 |
1.5ml×1 瓶 |
| 4 |
样品稀释液 |
6ml×1 瓶 |
10 |
说明书 |
1 份 |
| 5 |
显色剂 A 液 |
6ml×1 瓶 |
11 |
封板膜 |
2 张 |
| 6 |
显色剂 B 液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1 个 |
样本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
| 2400 ng/L |
5 号标准品 |
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
| 1200ng/L |
4 号标准品 |
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
| 600ng/L |
3 号标准品 |
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
| 300ng/L |
2 号标准品 |
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
| 150ng/L |
1 号标准品 |
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
人188kDa核孔蛋白(NUP188)ELISA试剂盒注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值
大于标准品孔的第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，
计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
人188kDa核孔蛋白(NUP188)ELISA试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在第一、第二孔中分别加标
准品 100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl，混匀；然后从第一孔、第二
孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl，
混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 弃掉，再各取 50μl 分别加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各
取 50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl，混
匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准
品稀释液 50μl，混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50μl，
浓度分别为 180ng/L，120ng/L ，60ng/L，30ng/L， 15ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样
品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混
匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 25 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 25 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
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文献和实验kDa预染的中高范围蛋白质分子量标准(20-210KD) 20次自产320元预染的中高范围蛋白质分子量标准(20-210KD) 50次自产680元分子量大小:210, 140, 106/102, 80, 52, 20 kDa预染的中高范围蛋白质分子量标准(18.3-210KD)2668148次Pierce1214元(二)蛋白质转印a)膜的选择:主要采用 NC膜和PVDF膜,其比较如下: NC膜PVDF膜物理强度差好蛋白质结合能力80-100ug/cm2100-200ug/cm2溶剂耐受力无有考马
.3gTris，188g甘氨酸，10gSDS，用蒸馏水溶解至1000ml，临用前稀释10倍。PH8.3 9、 转移缓冲液： 2.9g甘氨酸、5.8gTris碱、0.37g SDS（可不加），200ml甲醇（临用前加），加水至总量1L。 10、 丽春红染液储存液：丽春红S 2g 三氯乙酸30g 磺基水杨酸 30g 加水至100ml 用时上述储存液稀释10倍即成丽春红S使用液。使用后应予以废弃。 11、 脱脂奶粉5%(w/v)。 12、 NaN3 0.02% 叠氮钠(有毒，戴手套操作)，溶于磷酸
【资源】个人整理 Western Blot（步骤简略，但注意事项、经验总结、基本原理很全面）
。Western Blotting(检测条带大约在36kDa，稀释比例达10，000倍)、ELISA、亲和纯化、免疫荧光及免疫组化。注：因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的。在实验中，可能存在总蛋白浓度测定不准确；或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差；这些误差需要通过测定每个样品中实际转到膜上的GAPDH的含量来进行校正，所以一般的western实验都需要进行内参设置。具体校正的方法就是将每个样品测得的目的蛋白含量与本样品的GAPDH含量相除，得到每个样品
