北纳创联小鼠腹水瘤细胞系

异常凝血酶原单克隆抗体的制备与鉴定

有明显的克隆生长，取上清用间接ELISA法重复筛选后，克隆化，获3株阳性细胞。将培养上清液浓缩后进行亚类鉴定，3株细胞系皆为IgG1，染色体计数结果为80～110(每细胞系统计10个细胞)，杂交瘤细胞染色体数均超过其亲本染色体数，为二者之和。 　　2.2　单克隆抗体的纯化：小鼠腹水中除含有单抗外，还含有清蛋白、小鼠自身Ig及其他血清蛋白、脂肪，故纯化腹水中的单抗十分必要。我们采用辛酸法［见：叶群瑞.一种简便、快速、量大的辛酸纯化单抗法.生物化学与生物物理进展，1991；18(1)：60］

单克隆抗体的生产

获得稳定的杂交瘤细胞系后，即可根据需要大量生产单抗，以用于不同目的。一、单抗的大规模制备目前大量制备单抗的方法主要有两大系统，一是动物体内生产法，这是国内外实验室所广泛采用；另一是体外培养法。1、动物体内生产单抗的方法迄今为止，通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法，鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同品系的脾细胞融合而得，因此使用的动物当然首选BALB/c小鼠。本方法即将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内，在小鼠腹腔内生长杂交瘤，并产生腹水，因而可得到大量的腹水单抗且抗体

人用单克隆抗体质量控制技术指导原则

本要点适用于供治疗的体内诊断用的利用杂交瘤技术制备的单克隆、抗体，适用于在人体内应用的利用重复DNA技术制备的基因工程抗体一、杂交瘤技术制备的单克隆抗体（一）杂交瘤细胞1、亲本细胞（1）骨髓瘤细胞SP2/0或其他适宜的骨髓瘤细胞系。应为不合成或不分泌免疫球蛋白链型，具有符合骨髓瘤细胞的染色体特征，并有明确的来源历史及符合要求的保存条件。（2）免疫亲代细胞经抗原免疫的鼠脾B淋巴细胞或外周血B淋巴细胞。应有明确的免疫原来源、性质及动物种系，免疫原详细的制备过程。适宜的免疫方案及免疫淋巴