MCDB105培养基，M6395-1L

类器官培养与应用——血管类器官

%、且大部分无分化的状态时，吸出培养基。 3、向 hPSCs 中加入 0.5 mM EDTA 洗涤细胞一次。 4、吸去 EDTA 溶液，每孔加入 0.6ml Accutase，并将培养皿放置在 37℃ 解离约 3-5min，直到所有的细胞变圆。 5、向每个孔中加入 5ml 的 hPSCs 培养基，并用 0.1% 台盼蓝进行染色计数。 6、将所有细胞转移至 15ml 离心管中，室温下 300g 离心 3min，收集沉淀细胞。6 孔板中每孔接种 2×105 个细胞，加入预热的 3ml hPSCs 培养基

Transwell侵袭实验总结 －Transwell的其他应用的实验步骤

0.1%血清的培养基稀释好自己所需密度），放入培养箱，12-18小时后，取出Transwell，用棉签擦去PVPF膜靠近内室那一面的细胞，另一面的细胞用甲醛室温固定30分钟，结晶紫染色20分钟，用清水洗3遍以上，后在显微镜下观察细胞，记数。4．内皮细胞HMEC-1迁移实验 1%明胶处理的transwell经无血清的MCDB131培液于培养箱中平衡1小时后，上室加入100µl用serum-free MCDB131稀释的5*104/孔的HMEC及不同浓度的药物，下室加入0.6ml serum-free

细胞增殖和细胞毒性（CCK-8法）原理和经验总结

相比线性范围更宽，灵敏度更高； CCK-8细胞活性检测试剂无需预制，即开即用。 四、实验操作指南 1．96孔板每孔加入细胞100 μL（留2个空白组不加细胞，加入同体积的培养基）。细胞置于37°C的5%CO2细胞培养箱中培养24 h。 注：A、通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。 B、培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C