辣根过氧化物酶(POD)，9003-99-0，P6782-2

一般描述
辣根过氧化物酶是从辣根（Amoracia rusticana）中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量（约44 kDa）包括多肽链（33,890道尔顿）、氯化血红素加Ca2+ （约700道尔顿）和碳水化合物（约9,400道尔顿）。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。
应用
Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器，以便检测半乳糖。[1]它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联 苯胺（TMB）的培养基（MRS琼脂板）的组分，用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H2O2 催化分解为O2，并且TMB在O2存在下将菌落染成蓝色。因此，在含5% CO2 的空气环境下孵育48小时后，MRS琼脂上产生H2O2 的菌落呈深蓝色。不产生H2O2 的菌落仍为无色。[2]它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。[3]它还被用于测定溶液中的葡萄糖[4] 和过氧化物[5] 。
辣根过氧化物酶（HRP）分离自辣根中（Amoracia rusticana）。 它可用于生物化学应用，如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子（例如蛋白质）的可检测性。 产品P6782是VI-A型，本质上是一种无盐冻干粉。 它被用于定量胆固醇和胆固醇酯[6]，并用于研究水凝胶和硅水凝胶隐形眼镜的体外脂质沉积[7]。
生化/生理作用
HRP容易与过氧化氢（H2O2）结合，生成的[HRP-H2O2]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5，在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括使用戊二 醛、高碘 酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此，它是最理想的标记物。同时，其糖基化会产生较低的非特异性结合。
辣根过氧化物酶与底物一起孵育时，产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物，以便可以定量。 辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。