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联硕
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10ug
说明
一般描述
M-CSF(巨噬细胞集落刺激因子)是由多种细胞(包括淋巴细胞、单核细胞、成纤维细胞、内皮细胞、成肌细胞和成骨细胞)产生的一种有效造血因子。[1] 该蛋白通过其受体CSF1R(集落刺激因子1受体)起作用。[2] 人源分子在鼠类系统中具有反应性,但鼠类分子对人细胞无活性。重组人M-CSF是一种36.8kDa的同型二聚体蛋白,含有两个159个氨基酸的多肽亚基。
应用
人M-CSF已被用于诱导人外周血单核细胞中的破骨细胞的生成。[3]
生化/生理作用
M-CSF(巨噬细胞集落刺激因子)是血液单核细胞、组织巨噬细胞及其祖细胞的细胞增殖、分化和存活的关键调节因子。[1] M-CSF已被证明在调节真皮厚度以及男女生殖能力中起重要作用。[4] M-CSF在临床上可用于治疗感染、恶性肿瘤和动脉粥样硬化。[5] 它有助于骨髓移植后的造血恢复。M-CSF也可作为多效性生长因子,在生殖和器官发生中起关键作用。缺乏它会导致生长减少,神经和生殖问题,乳腺、骨骼和胰腺发育缺陷。[6] M-CSF也参与癌症的发病机制。[7]
序列
MEEVSEYCSH MIGSGHLQSL QRLIDSQMET SCQITFEFVD QEQLKDPVCY LKKAFLLVQD IMEDTMRFRD NTPNAIAIVQ LQELSLRLKS CFTKDYEEHD KACVRTFYET PLQLLEKVKN VFNETKNLLD KDWNIFSKNC NNSFAECSSQ GHERQSEGS
外形
从 10mM 磷酸钠,pH 8.0 + 75 mM NaCl中冻干。
重悬
在打开之前将小瓶进行离心。用水进行重悬至浓度为0.1-1.0 mg/ml。不要涡旋。该溶液可在2-8℃下储存最长达1周。如需更长时间的储存,建议使用含有稳定剂(如5%海藻糖)的缓冲液进行进一步的稀释,并在分装成工作体积后冻存在-20°C至-80°C
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文献和实验酶链反映法; 7、免疫学方法; 8 、支原体的培养。 对于支原体污染的细胞,可以采取补救措施: 1、抗生素排除法:可以用5-10倍于常用量的冲击法,加入高浓度抗生素后作用24-48小时,再换入常规培养液,有时可能有效。推荐用量:庆大霉素 200ug/ml ,四环素10ug/ml ,卡那霉素50ug/ml 。对于支原体污染抗生素应用,预防性应用比污染后使用好。 2、 加温除菌:根据支原体耐热性能差的特点。将受支原体污染的细胞置于41度中作用5-10小时可以杀灭支原体。但由于41度对培养
RNase Protection Assay (Bowtell Lab)
buffer: 10mM Tris pH 7.5 5mM EDTA 300mM NaCl 40ug/ml RNAse A (Sigma) 2ug/ml RNAse T1 (Sigma) 11. Incubate at ___ � for ____min. Optimal times and temperatures vary for different probes. Overdigestion gives lots of smlall bands and underdigestion
+ 0.01% Triton X-100 + 1mM DTT + 1mM EGTA. Variables include lowering salt (above recipe is about 136mM in NaCl). replacing EGTA with 1m M CaCl2, replacing ATP with ADP. ATP Sigma#A5394 ADP Sigma #A6521 10X PBS: 80 grams NaCl + 2 grams
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