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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
Pyruvate carboxylase (PC) activity assay kit
- CAS号:
/
- 保质期:
详见说明
- 供应商:
齐源生物
- 保存条件:
2-8℃
丙tong酸羧化酶(PC)酶活测定试剂盒详细如下:
测定意义:
丙tong酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中,催化丙tong酸、ATP、CO2 和水生成草酰乙酸、ADP 和 Pi,是糖异生过程的第一个限速酶, 在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。
测定原理:
PC 催化丙tong酸、ATP、CO2 和水生成草酰乙酸、ADP 和 Pi,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和 NADH 生成苹果酸和NAD+,在 340nm 下测定 NADH 氧化速率,即可反映 PC 活性。需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 18 mL×1 瓶, 4℃保存;
试剂二:液体 13uL×1 支,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存;
试剂四:粉剂×1 支,-20℃保存;
样本的前处理
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1、 称取约 0.1g 组织或收集500 万细菌或细胞,加入1mL 提取液,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
3、 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心 10min。
4、 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的 PC(此步可选做)。
5、 在步骤④的沉淀中加入 1mL 提取液,超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3
秒,间隔 10 秒,重复 30 次),用于线粒体 PC 活性测定。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
工作液的配制:临用前将试剂二和试剂三转移到试剂一中混合溶解待用;置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 5 分钟;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四的配制:在试剂四瓶中加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
2、 在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、10μL 试剂四和 180μL 工作液,立即混匀,记录 340nm 处初始吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A1-A2。
注意:在该试剂盒中,若 ΔA 大于 0.5,需将样本用提取液稀释适当倍数后测定,使 ΔA 小于 0.5 可提高检测灵敏度。计算公式中乘以相应稀释倍数。
齐源生物提供ELISA试剂盒,试剂盒代测,木质素代测,纤维素代测服务。
上海齐源生物科技有限公司长期提供各种生物生化试剂盒价格实惠,质量有保证,信誉第一。
上海齐源生物科技有限公司提供
规格:50T/100T
检测方法:比色法(常量/微量)
应用领域:用于科学研究、教学、分析检测中。
用途:生化研究,科研实验
现货供应,发货速度快,江浙沪1-2天到货,其他地区3-4天。
产品优点
1、快速简便:全程约2小时,可测24/48/96例以上样本。
2、稳定性好:试剂盒2 ~ 8℃存放3个月有效。
3、再现性好:变异系数。
4、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
注意∶请用防水油性笔标注在塑封袋外面或标签纸上,勿写在锡箔纸上面,注意标号要清晰样本较多的情况下(多于 50个),务必将编号单独打印出来以便于核对。代测样本处理后,实验结束后样本概不退回,请您邮寄够本次实验检测用的样本即可。
| QYS-237023 | 丙tong酸羧化酶(PC)酶活测定试剂盒 | 微量法100管/96样 |
| QYS-237024 | 丙tong酸羧化酶(PC)酶活测定试剂盒 | 分光光度法50管/48样 |
丙tong酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)广泛存在于动物、霉菌和酵母的线粒体中,催化丙tong酸、ATP、CO2 和水生成草酰乙酸、ADP 和 Pi,是糖异生过程的第一个限速酶, 在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。
测定原理:
PC 催化丙tong酸、ATP、CO2 和水生成草酰乙酸、ADP 和 Pi,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和 NADH 生成苹果酸和NAD+,在 340nm 下测定 NADH 氧化速率,即可反映 PC 活性。需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 18 mL×1 瓶, 4℃保存;
试剂二:液体 13uL×1 支,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存;
试剂四:粉剂×1 支,-20℃保存;
样本的前处理
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1、 称取约 0.1g 组织或收集500 万细菌或细胞,加入1mL 提取液,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
3、 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心 10min。
4、 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的 PC(此步可选做)。
5、 在步骤④的沉淀中加入 1mL 提取液,超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3
秒,间隔 10 秒,重复 30 次),用于线粒体 PC 活性测定。
测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
工作液的配制:临用前将试剂二和试剂三转移到试剂一中混合溶解待用;置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 5 分钟;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四的配制:在试剂四瓶中加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
2、 在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、10μL 试剂四和 180μL 工作液,立即混匀,记录 340nm 处初始吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A1-A2。
注意:在该试剂盒中,若 ΔA 大于 0.5,需将样本用提取液稀释适当倍数后测定,使 ΔA 小于 0.5 可提高检测灵敏度。计算公式中乘以相应稀释倍数。
齐源生物提供ELISA试剂盒,试剂盒代测,木质素代测,纤维素代测服务。
| 维生素A含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素C含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素B1(硫胺素)含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素B2(核黄素)含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素B3(烟酸)含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素B5(泛酸)含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素B6(吡哆醇)含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素B9(叶酸)含量 | 高效液相色谱法 |
| 烟酰胺含量 | 高效液相色谱法 |
| 维生素B17(苦杏仁苷)含量 | 高效液相色谱法 |
| 亚麻酸含量 | 高效液相色谱法 |
| 亚油酸含量 | 高效液相色谱法 |
| 油酸含量 | 高效液相色谱法 |
| ATP含量 | 高效液相色谱法 |
| ADP含量 | 高效液相色谱法 |
| AMP含量 | 高效液相色谱法 |
上海齐源生物科技有限公司提供
规格:50T/100T
检测方法:比色法(常量/微量)
应用领域:用于科学研究、教学、分析检测中。
用途:生化研究,科研实验
现货供应,发货速度快,江浙沪1-2天到货,其他地区3-4天。
产品优点
1、快速简便:全程约2小时,可测24/48/96例以上样本。
2、稳定性好:试剂盒2 ~ 8℃存放3个月有效。
3、再现性好:变异系数。
4、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
注意∶请用防水油性笔标注在塑封袋外面或标签纸上,勿写在锡箔纸上面,注意标号要清晰样本较多的情况下(多于 50个),务必将编号单独打印出来以便于核对。代测样本处理后,实验结束后样本概不退回,请您邮寄够本次实验检测用的样本即可。
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