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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
Coenzyme I NAD (H) assay kit
- CAS号:
-
- 保质期:
详见说明
- 供应商:
齐源生物
- 保存条件:
2-8℃
| QYS-231008 | 辅酶ⅠNAD(H)含量测定试剂盒 | 微量法 100管/48样 |
| QYS-231009 | 辅酶ⅠNAD(H)含量测定试剂盒 | 可见分光光度法 50管/24样 |
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和
三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的 NADH 经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给
氧,在合成 ATP的同时,形成大量的 ROS,同时 NADH 再生为 NAD+。糖、脂、蛋白质三
大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比
值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的 NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明
细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和
TCA 循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原
氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为
NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏
水。
试剂的组成和配制
酸性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,-20℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 瓶,4 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;
试剂五:液体 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。
NAD+和 NADH 的提取
1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取
NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建
议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);
冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中
和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建
议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);
冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中
和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
| QYS-300133 | 结合态水杨酸(SA)含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300134 | 独角金内酯(5-脱氧独角金醇)含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300135 | 噻苯隆含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300136 | 氯吡脲含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300137 | 华法林含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300138 | 山楂酸含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300139 | 白桦脂酸含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300140 | 科罗索酸含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300141 | 甘草酸含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300142 | 甘草次酸含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300143 | 甘草苷含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300144 | 原儿茶酸含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300145 | 蔗糖含量测定(低聚糖)含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300146 | 棉子糖含量测定(低聚糖)含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300147 | 水苏糖含量测定(低聚糖)含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300148 | 海藻糖含量测定 | 高效液相色谱法 |
| QYS-300149 | 阿拉伯糖含量测定 | 高效液相色谱法 |
上海齐源生物科技有限公司提供
规格:50T/100T
检测方法:比色法(常量/微量)
应用领域:用于科学研究、教学、分析检测中。
用途:生化研究,科研实验
现货供应,发货速度快,江浙沪1-2天到货,其他地区3-4天。
产品优点
1、快速简便:全程约2小时,可测24/48/96例以上样本。
2、稳定性好:试剂盒2 ~ 8℃存放3个月有效。
3、再现性好:变异系数。
4、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
齐源生物科技(上海)有限公司专业经营生化试剂-生化检测试剂盒-分子学试剂盒-检测试剂盒-高效液相色谱法、可见分光光度法、紫外分光光度法、酶标法检测试剂盒齐源生物提供样本代测,紫外法检测,微量法检测,HPLC高效液相色谱法检测,GC高效气相法检测,ELSA酶法检测,客户只需要邮寄样本和需要检测的指标,专业的代测就交齐源生物;客户邮寄样本编号,用防水油性笔标注在塑封袋外面或标签纸上,勿写在锡箔纸上面。
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文献和实验异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase
异柠檬酸脱氢酶 isocitrate dehydrogenase 有两种类型的酶:要求以 NAD为辅酶的酶( EC1. 1. 1. 41)和要 NADP的酶( EC1. 1. 1. 42),两者催化同一反应。 异柠檬酸 NAD( P) α -酮戊二酸 CO2 NAP( P) H H4 在三羧酸循环中正常起作用的是要求 NAD为辅酶的酶,此酶是为 ADP激活的变构酶。
)( H.von Euler ),后来知道,辅酿酶是以烟酰胺为组成成分的 NAD 。 NAD 也可以看成是脱氢酶的共同底物,由于两个脱氢酶作用,在发酵中间产物之间进行氢的传递(例如乙醛被甘油醛 -3- 磷酸还原),或者起着把从底物接受的氢转移给呼吸链的载体的作用。 NAD 是作为维生素取获的烟酸,烟酰胺在体内由 ATP 参与的酶反应所合成的。这种水溶性维生素多数在体内变成辅酶,和酶蛋白一起在转移底物化学基团的酶反应中起着作用。(见下表)。此外,与维生素无关的物质还有与磷酸等基团转移有关的 ATP
系可逆地催化醇脱氢形成醛(或酮)的酶,参与醇的发酵。 EC1. 1. 1. 1。 CH3 CH2 OH NAD CH3 CHO NADH H 。底物专一性较广,亦作用于其他的醇。除酵母外,也广泛存在于高等植物(特别在发芽时活性增强)、动物肝脏、细菌等生物界。已从酵母( E. Negelein, H. J. Wulff1937)或肝脏中以结晶状态被提取出来。由酵母获得的结晶分子量约 15万,由 4个亚基组成,与 4个 NAD 及锌结合的 SH酶。肝脏
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