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- EY-L99448
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温冷藏
- 保质期：
详见说明书
- 英文名：
Lamp kit for Rickettsia burgdorferi
- 库存：
100
- 供应商：
上海一研
- 规格：
50次
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
MG 鸡毒支原体抗体 0.2ml
NCF/NCF4/p40phox 嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体 0.1ml
Phospho-p40phox (Thr154) 磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体 0.1ml
MYOG/Myogenin 肌红蛋白抗体(肌细胞生成素) 0.1ml
Nephrin 肾小球细胞粘附分子受体抗体 0.1ml
Nectin 2/CD112 细胞粘附分子CD112抗体 0.1ml
Nectin 4 脊髓灰质炎病毒受体相关蛋白4抗体 0.2ml
NLK/Nemo-like kinase Nemo样激酶抗体 0.1ml
Nectin 3/CD113 细胞粘附分子3抗体（脊髓灰质炎病毒受体相关蛋白3） 0.1ml
Nestin 巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 0.1ml
Nestin 巢蛋白/神经上皮干细胞蛋白抗体 0.1ml
Neurobeachin 蛋白激酶锚定蛋白抗体 0.2ml
AKAP95/AKAP8 蛋白激酶A锚定蛋白95抗体 0.1ml
NeuN 神经元核抗原抗体 0.1ml
Nrn1/Cpg15/Neuritin 转化神经突起蛋白抗体 0.2ml
Neurocan 神经粘蛋白抗体 0.1ml
NGB/neuroglobin 脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体 0.1ml
NeuroD1/NEUROD 神经细胞分化因子1抗体 0.1ml
Neurofascin/Nfasc155 神经束蛋白155抗体 0.2ml
Neurogenin 2/NGN2 神经元素2抗体 0.1ml
NT/NTS1/NTRH 神经降压素抗体 0.1ml
NF2/Neurofibromin 2 2型神经纤维瘤抗体 0.1ml
Phospho-NF2(Ser518) 磷酸化2型神经纤维瘤抗体 0.1ml
NF1/Neurofibromin 1 1型神经纤维瘤抗体 0.1ml
NFATc1/NFAT2 活化T细胞核因子1蛋白抗体 0.1ml
phospho-NF1(Ser2515) 磷酸化1型神经纤维瘤抗体 0.1ml
NFAM1/CNAIP NFAM1抗体 0.2ml
phospho-NF1(Ser2817) 磷酸化1型神经纤维瘤抗体 0.1ml
NFAT1/NFATc2 核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 0.1ml
phospho-NFATc2(Ser326) 磷酸化核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 0.1ml
phospho-NFATc2(Ser330) 磷酸化核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 0.1ml
NFBD1/MDC1 DNA损伤关卡蛋白1抗体 0.2ml
NF-H/Neurofilament H/Neurofilament 200 高分子量神经丝蛋白抗体 0.1ml
NFKB p52/NFKB2 细胞核因子/k基因结合核因子 p52/p100抗体 0.2ml
Phospho-NFKB2(Ser866+Ser870) 细胞核因子/k基因结合核因子p100抗体 0.1ml
NFKB p65 细胞核因子/k基因结合核因子抗体 0.1ml
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500nm，最大发射光谱在 530nm。
伯氏立克次氏体(柯克斯体)LAMP试剂盒注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验立克次氏体 立克次氏体（Rickettsia）为革兰氏阴性菌，是一类专性寄生于真核细胞内的G-原核生物。是介于细菌与病毒之间，而接近于细菌的一类原核生物医学教育网搜集|整理。一般呈球状或杆状，是专性细胞内寄生物，主要寄生于节肢动物，有的会通过蚤、虱、蜱、螨传入人体、如斑疹伤寒、战壕热。
专性细胞内寄生、行二分裂繁殖的原核微生物类群。英国医生立克次氏（H.T.Ricketts）研究斑疹伤寒时发现，并于1919年命名。大小介于细菌与病毒之间，除Q热立克次氏体外，均不能通过细菌滤器。细胞球状、杆状或多形态。球状体直径0.2～0.5微米，杆状体大小0.3～0.6×0.8～20微米，有些种在细胞分裂前可长达4微米。形态特征对种的鉴定有重要意义。革兰氏染色阴性。在光学显微镜下可见，存在于宿主的胞质或细胞核中。细胞结构与细菌相似，细胞壁中含有胞壁酸，二氨基庚二酸等与细菌
）和巴通体（Bartonella）；γ亚群包括柯克斯体（Coxiella）和沃巴哈体（Wolbachia）。现并已发现很多新的种属如日本立克次体（Rickettsiajaponica）、查菲埃立克体（EhrlichiaChaffeensis）、腺热埃立克次体（EhrlichaSennetsu）、汉赛巴通体（Bartonellahenselae）等。罗卡利马体（Rochalimaea）的名称已为巴通体所取代，故战壕热的病原体也应改称为五日热巴通体（Bartonellaquintana）。新的立克次氏体
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