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CytoCt™ 细胞裂解直接R
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GeneCopoeia
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1 ml lysis buffer,40 μl DNase I (20 rxn)/5 ml lysis buffer,200 μl DNase I (100 rxn)/1 ml lysis buffer,40 μl DNase I, first-strand cDNA synthesis kit (20 rxn)/5 ml lysis buffer,200 μl DNase I(100 rxn), one-step SYBR green RT-qPCR Kit (200 rxn, with ROX)/5 ml lysis buffer,200 μl DNase I (100 rxn), one-step SYBR green RT-qPCR Kit (200 rxn, without ROX)/5 ml lysis buffer,200 μl DNase I(100 rxn), BlazeTaq™ Probe One-Step RT-qPCR Kit (200 rxn, with ROX)/5 ml lysis buffer,200 μl DNase I(100 rxn), BlazeTaq™ Probe One-Step RT-qPCR Kit (200rxn, without ROX)
CytoCt™ RT-qPCR体系应用于试管或96孔板培养的10-100,000细胞基因表达水平的检测,该体系无需任何RNA纯化,操作更简便、快捷,灵敏度更高,实验数据更可靠。传统的方法是对培养细胞进行提取和纯化RNA,然后用RT-qPCR体系进行基因表达定量和分析。CytoCt™ RT-qPCR体系在96孔板或其他形式培养的细胞中制备细胞裂解物,无需RNA提取步骤,细胞裂解物通过two-step或者one-step RT-qPCR,在约1.5h即可完成基因定量检测。
GeneCopoeia提供的CytoCt™ RT-qPCR体系包括:CytoCt™ cell lysis buffer(只含裂解液)、CytoCt™ cDNA synthesis kit(含裂解液、cDNA合成试剂)和CytoCt™ One-Step RT-qPCR kits(含裂解液、一步法RT-qPCR试剂)。
操作流程将细胞培养到所需的细胞数,然后加入裂解液,在室温下孵育10分钟。转移到PCR板上,运行程序:25℃ 2分钟,37℃ 5分钟,75℃ 10分钟。裂解物可以直接进行RT-qPCR反应,或者储存起来以备将来使用。
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